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目的
探讨与膜-细胞骨架连接蛋白家族结合的磷酸化蛋白50(EBP50)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内Akt1磷酸化水平、细胞分泌明胶酶的活性以及细胞骨架表达和分布的影响，阐明其影响人血管内皮细胞增殖、迁移及成管的分子机制。
方法构建EBP50的真核重组表达载体，将重组质粒分别稳定转染HUVEC细胞系，经Western blot法验证后，采用MTT法检测细胞的增殖活性；应用划痕法检测细胞的迁移能力；应用Matrigel法检测细胞的成管能力；应用Western blot检测EBP50对Akt1磷酸化水平的影响；应用明胶酶谱法检测HUVEC细胞分泌的明胶酶活性；应用免疫荧光观察细胞骨架的分布。
结果转染的外源性EBP50 cDNA片段已整合到基因组中；与对照组细胞比较，EBP50能显著抑制细胞的增殖、迁移及成管能力，并且EBP50明显下调Akt1的磷酸化水平(t＝2.98，P<0.01)；同时使HUVEC分泌的MMP2活性下降，并影响血管内皮细胞内细胞骨架的分布。
结论EBP50可以抑制HUVEC细胞的增殖、迁移及成管，其机制可能与调整Akt1的磷酸化水平、调节细胞分泌明胶酶的活性及影响微丝细胞骨架分布有关。