克隆载体相关论文
在基因工程中,克隆载体为实验操作的核心部分,根据生物学效应分为克隆载体、表达载体和穿梭载体,其中克隆载体在基因工程中占有重要的......
简要介绍了几种主要克隆载体的种类、特点,并对新型克隆载体—可转化人工染色体克隆载体的优点及其在果树基因工程上的应用前景作......
本实验采用PCR方法,以中国妇女宫颈癌组织DNA为模板扩增出了3株HPV16L1晚期基因DNA片段,扩增参数为94℃1min,55℃30s,72℃2min,共35个循环。将扩增产物HPV16L1DNA片段与克隆载体pCR2.1连接构建......
为了建立一种双重荧光定量PCR方法检测肠毒素cpe阳性的产气荚膜梭菌,试验通过对部分发表在NCBI中的产气荚膜梭菌序列进行比对,找到......
目的构建小鼠甲状腺转录因子-2(TTF-2)转基因动物表达载体(pBROAD3-TTF-2),观察其在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)中的表达。方法从C......
目的制备人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)基因型耐药检测能力验证考核品,并对其均匀性和稳定性进行评估。方法选取前期检测出的5个HIV-......
目的:寻找更简便精确的方法来检测人凝血因子Ⅷ的抗原表位。方法:采用PCR技术从人凝血因子Ⅷ的克隆载体pENTR223.1/FⅧ上克隆出FⅧ......
抑制血管再生可能是治疗实体瘤的有效途径。肿瘤血管生成的主要调控者是血管内皮细胞生长因子(VEGF)。VEGF的 5种异构体中VEGF165是表达丰度最......
目的 :制备具有治疗活性的野生型p5 3基因真核表达载体的细胞疫苗。方法 :利用RT PCR从人外周血淋巴细胞总mRNA中扩增出全长的野生......
随着 PCR及其相关技术的不断发展和完善 ,其应用范围日益广泛 ,如何方便、快捷和高效地克隆PCR产物越来越成为众多研究者关注的焦......
应用完整的DMDcDNA探针,从人YAC基因文库中筛选并Southern杂交鉴定5个YAC-DMD克隆,其分子量分别为900kb,800kb,650kb,450kb和450kb。这些克隆是抗肌萎缩蛋白基因特定区域DNA用之不竭的源泉,为抗肌......
一株莱姆病螺旋体外膜蛋白C的基因克隆与序列测定佟玉品毕胜利冯方波汪治清周国萍莱姆病(Lymedisease)是近年来逐渐被认识的一种蜱媒疫源性疾病,其......
[目的]构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3解旋酶基因原核表达载体,为进一步研究和解析NS3的解旋酶基因对病毒复制的机制准备条件......
目的构建含有HLA-DRA和DRB4*01030101基因全长开放阅读框的cDNA克隆载体。方法用RT-PCR方法从人外周血白细胞中获得HLA-DRA和DRB4*......
为了重组基因能良好地表达,需要发展多种克隆体系。本文综述了枯草杆菌作为克隆载体的优点,枯草杆菌中天然质粒的筛选,异源质粒的......
由于在设计和重建克隆基因新载体方面的进展,基因疗法的前景有所改善。欧洲和美国研究人员制造了一种可将外界基因导入哺乳动物细......
Duchenne肌营养障碍(DMD)是一种X连锁进行性肌病,它由于DMD基因位点一缺陷所致。对应DMD位点的基因产生14kb mRNA,它编码一种大的......
本文通过一对分别位于小鼠免疫球蛋白轻链可变区基因 FR1骨架区和 FR4骨架区的通用引物,利用 PCR 技术首次从小鼠抗人小细胞肺癌2F......
产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)是幼畜、婴幼儿及旅游者腹泻的重要病原菌之一。作者以大肠杆菌pSLM004菌株为始发菌株,利用合成的一对......
利用DNA重组技术,将分离到的bcr/ablcDNA片段克隆到质粒pSP72中。在这个中间克隆载体中,此cDNA片段两端的酶切点已被调整。利用此中间克隆载体和逆转录病毒载......
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将人工合成的恶性疟原虫45肽抗原基因HPFA和75肽抗原基因HGFC分别从克隆载体上切下,经过一系列的串接和克隆,筛选出含有HGFC-HPFA-HGFC三连体基因(HGFCAC)的重组克隆,经酶......
本文采用LPS刺激健康人外周血的单核细胞,提取其总的RNA,采用逆转录PCR扩增目的基因,并且将获得的目的基因连接到克隆载体中,通过D......
在大肠杆菌中建立了一套用于测定DNA聚合酶在PCR过程中复制精确性的系统,并测定了耐热FDDNA聚合酶在PCR扩增过程中的复制精确性。这一系统主要包括......
大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)是一种有效的粘膜免疫原,口服或鼻内接种后可诱导高分泌性和全身性抗体应答。此外,LT在抗其他共服抗原的抗体......
采用PCR技术从草分枝杆菌(Mycobacterium phlei)基因组中扩增出亮氨酰-t RNA合成酶基因leu RS,依次克隆入p MD19-T Simple克隆载体......
提出了利用寡核苷酸探针快速筛选重组克隆的方法,在数小时内即可完成杂交和自显影的过程。以克隆羊β-乳球蛋白基因(BLG)第一内含子为例进......
采用PCR方法,从HPV16型野毒株质粒中分离出HPV16L1(55597151bp)、HPV16E7C(682855bp)基因片段,采用PCR产物的TA克隆法,将L1、E7C分别插入pGEMTEasy载体,构建克隆载体pTAL1、pTAE7C。BamHⅠ、HindⅢ酶切pTAE7C,Bg1Ⅱ、ClaⅠ酶切pTAL1,回收......
目的:对国人神经生长因子β亚基(βNGF)cDNA 进行克隆及序列分析,为研究βNGF 的生理功能及其在临床应用提供基础与手段。方法:从人海马组织分离,纯......
目的:克隆人降钙素基因(hCT)并经序列分析予以确证。方法:首先自新鲜全血中用含TritonX-100的缓冲液提取基因组DNA,经酒精沉淀和洗涤后,作为模板,加入上下游......
为研究血小板衍生生长因子 A(Platelet- derived growth factor,PDGF- A)的分子生物学 ,从人工饲养的动脉硬化模型兔的主动脉壁平......
目的构建弓形虫ZS2株pcDNA3-ROP1真核表达重组质粒,为进一步表达及DNA免疫做准备。方法用PCR技术从弓形虫ZS2分离株的基因组DNA中扩增编码棒状体蛋白1(ROP1)的基因片段......
目的 :克隆变形链球菌葡聚糖结合蛋白C基因 (gbpC)编码序列的特异片段。方法 :根据文献报道的gbpC序列设计并合成一对寡核苷酸引物......
目的 :构建大鼠钠尿肽 B受体 c DNA探针克隆载体 ,为研究该受体基因表达奠定基础。方法 :设计钠尿肽 B受体特异的 PCR引物 ,提取大......
目的:克隆人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)完整成熟肽基因。方法:依据Genbank中hBMP-2的序列化学合成两条引物,从人胎儿骨组织中提取得到的总RNA中,通过反转录聚合酶链......
以戊型肝炎 (HepatitisE)病人高热期血清为原材料 ,设计特定引物 ,经RT PCR扩增获得开放阅读框 2 (ORF2 ) 1.3kb基因片段 ,用EcoRI......
根据编码人IgG1Fc(Fcγ1 )的基因序列 ,设计合成 1对与之相匹配的引物。采用RT PCR法 ,从正常人白细胞mRNA中扩增获得预期目的基因......
目的 为进一步研究人白细胞介素 (hIL - 18)的生物学特性打下基础 ,进行hIL - 18的基因克隆及原核表达。方法 采用反转录PCR(RT ......
目的构建含有K10Q、R30I、S165W及K10Q/R30I/S165W4种t PA突变体。方法采用PCR重叠延伸法进行突变体的构建。结果成功地构建了上述......