【摘 要】
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内蒙古奶豆腐分离出的7株植物乳杆菌经耐受性、Caco-2细胞黏附能力、表面疏水性、体外降胆固醇和抗氧化能力等分析,筛选出上皮细胞粘附能力较强的潜在益生菌株C37.小鼠灌喂实验表明,C37能有效调节小鼠肠道菌群(乳杆菌数量增加了2.89倍,肠球菌数量减少了73.69％；对双歧杆菌属,阴沟杆菌属和梭状抱杆菌属数量无显著变化).荧光标记植物乳杆菌C37显示其以包裹的形式黏附于Caco-2细胞表面,对4株
【机 构】
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吉林省农业科学院农产品加工研究所,长春,130033;吉林大学生物与农业工程学院,长春,130022
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内蒙古奶豆腐分离出的7株植物乳杆菌经耐受性、Caco-2细胞黏附能力、表面疏水性、体外降胆固醇和抗氧化能力等分析,筛选出上皮细胞粘附能力较强的潜在益生菌株C37.小鼠灌喂实验表明,C37能有效调节小鼠肠道菌群(乳杆菌数量增加了2.89倍,肠球菌数量减少了73.69％；对双歧杆菌属,阴沟杆菌属和梭状抱杆菌属数量无显著变化).荧光标记植物乳杆菌C37显示其以包裹的形式黏附于Caco-2细胞表面,对4株常见病原菌的上皮细胞黏附形成抑制,动物肠道组织切片也显示,菌株C37能够减轻沙门氏菌引起的小鼠肠炎.激光共聚焦观察小鼠肠道内壁和肠内容物菌落计数结果显示菌株C37能够有效定植于小鼠肠道末端(盲肠、结肠),最长黏附时间可达7d,但Mucin蛋白黏附数据表明植物乳杆菌C37的肠道黏附可能与Mucin蛋白无关.LC/MS/MS鉴定植物乳杆菌表面蛋白47个,其中跨膜蛋白(Cytoplasmic Membrane) 11个,胞内蛋白(Cytoplasmic)25个,胞外蛋白(Surface)5个,位置未知(Unknown)蛋白6个.对蛋白功能分析预测表明,兼职蛋白(GROEL,GAPDH,EF-TU与ENO)可能是影响植物乳杆菌C37上皮细胞黏附能力的主要因素.对GROEL蛋白进行大肠菌克隆表达和纯化,获得的蛋白对C37菌株Caco-2细胞黏附具有调节作用(Caco-2细胞粘附抑制率最高40.34％),印证了分析预测结果.
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