炎症发生后吴茱萸碱对调节性T细胞的作用研究

来源 :2013中国医师协会中西医结合医师大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chensheng76
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  目的 吴茱萸是一种传统中药,用于头痛、腹痛、呕吐、产后失血等的治疗.吴茱萸碱(Evodiamine,EVO)是从吴茱萸中提取的生物碱成分之一,具有多种生物学活性.近年来,国内外一些研究表明它具有明显的抗炎和抗肿瘤活性.调节性T细胞(regulatory T cell)是一群具有负调节机体免疫反应的淋巴细胞,通常起着维持自身耐受和避免免疫反应过度损伤机体的重要作用.然而,目前还不清楚EVO的抗炎作用是否和Treg相关.因此,我们以C57BL/6背景的Treg荧光单标小鼠为实验动物,对酵母多糖(Zymosan,Zym)致炎条件下EVO药效和Treg的关系进行了初步研究.方法 Treg荧光单标小鼠(即C57BL/6背景的Foxp3-GFPKI小鼠)由美国哈佛大学医学院高闻达教授馈赠,引进后按照无特定病原体动物(special pathogen free,SPF)级动物饲养标准进行.取6只成年B6KI雄性小鼠共分为6组:对照组、Zym致炎组和Zym致炎复合Evo治疗组,致炎后12h、 24h取材,每组1只.(Zym腹腔注射剂量600mg/kg;Evo腹腔注射剂量10mg/kg).在相应时间点,将小鼠全身肝素化后取全血、周围淋巴结和脾脏,全血用红细胞裂解液裂解血细胞,周围淋巴结和脾脏碾磨后取细胞,分别用PE-antimouse CD4、PECY5-antimouse CD8a及其各自同型对照染色后进行流式细胞检测.结果用SPSS13.0软件采用单因素方差分析方法进行统计学分析.结果 各组别全血CD4+ Treg的变化趋势基本一致,即Zym only组和Zym+ Evo组均明显低于对照组(P<0.05),但Zym+Evo组又稍高于Zym only组;而且CD4+Treg的数量百分比均显著高于相应组别的CD8a+Treg(P<0.05).各组Zym only组和Zym+Evo组均高于对照组,其中Zym+Evo组又稍高于Zym only组;而且CD4+Treg的数量百分比均显著高于相应组别的CD8a+Treg(P<0.05).结论 可以初步认为,Zym介导的炎症反应发生12h和24h过程中Treg的消炎作用被抑制.全血和LN+SP在致炎后12h,各实验组Treg数量百分数均小于对照组,但LN+SP淋巴细胞的差异不如全血明显,可能因为炎症反应的过程首先是通过血液循环来进行的.另一方面,致炎24h后各组全血的结果与12h相似,但致炎组和治疗组LN+SP中CD4+Treg比例明显高于对照组,说明Treg先是聚集在周围淋巴结发挥作用,其入血还需要一个过程.
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