【摘 要】
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研究目的:将载有镁的乳酸-羟基乙酸共聚物(poly（lactic-co-glycolic acid）（PLGA）微球添加到藻酸盐凝胶中,制成新型微球-凝胶复合体,检测其部分理化性质,并观察MC3T3-E1细胞在其表面的黏附、增殖情况。研究方法:使用乳化法制备PLGA微球,将MgCO3和MgO按1:1的比例载入到PLGA微球中,制备平均密度分别为1×10-3kg/m~3、3×10-3kg/m~3、5
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研究目的:将载有镁的乳酸-羟基乙酸共聚物(poly（lactic-co-glycolic acid）（PLGA）微球添加到藻酸盐凝胶中,制成新型微球-凝胶复合体,检测其部分理化性质,并观察MC3T3-E1细胞在其表面的黏附、增殖情况。研究方法:使用乳化法制备PLGA微球,将MgCO3和MgO按1:1的比例载入到PLGA微球中,制备平均密度分别为1×10-3kg/m~3、3×10-3kg/m~3、5×10-3kg/m~3、7×10-3kg/m~3的B、C、D、E组Ca2+-微球悬浊液作为实验组(其中Ca2+作为凝胶交联剂),另外制备单纯的Ca2+溶液作为对照组A组,每组Ca2+浓度均为5g/L,将A、B、C、D、E组液体分别与等量的藻酸盐溶液混合,制出特定大小的水凝胶。使用扫描电镜（SEM）观察各组凝胶的内部结构形貌;将各组水凝胶浸泡在溶菌酶溶液中,分别于浸泡后的第1、3、5、7、14、21天时将凝胶样本取出,经冻干后称重,计算降解率;将各组水凝胶样本浸泡于双蒸水及磷酸盐缓冲液（PBS）中,1d后将其取出,经冻干后称重,分别计算各组样本的溶胀率;将载镁微球浸泡于不含血清的细胞培养基中,通过电感耦合等离子体光感仪器（ICP）检测浸泡后1、3、5、7、14、21天时的Mg2+析出浓度,使用同样的方法检测各组水凝胶的Mg2+析出浓度。MC3T3-E1细胞接种于凝胶表面,在接种后2h、6h、18h时,分别计算各组的细胞黏附率,并使用SEM观察各组细胞的黏附形态;在细胞培养后的1、3、5天分别使用AM/PI染色法观察每组接种在凝胶表面的活/死细胞数量,并用CCK-8法测定细胞的增殖活性。采用Graph Pad Prism 8.0.2软件包对数据进行统计学分析。研究结果:SEM观察发现随着微球量的增加,新型微球-凝胶复合体内部结构展现出更加致密的结构;随着时间的推移,该微球-凝胶复合体的降解率与对照组相比明显减缓;各实验组凝胶的溶胀率与对照组相比明显增大（P＜0.05）,但实验组间的溶胀率却无明显差异;ICP测定结果显示,添加了含镁微球的凝胶中Mg2+的析出浓度较为均匀稳定,改善了单纯载镁微球浸泡液Mg2+突释的现象;细胞实验结果表明,与对照组相比,实验组凝胶表面细胞的黏附、增殖行为被明显促进,其中C组细胞黏附效果最佳,而D组细胞增殖效果最佳。结论:新型微球-凝胶复合体能够促进细胞黏附、增殖行为,同时可通过改变载镁微球的含量来调整凝胶致密性、降解速率、离子析出速率等理化性能,为可注射骨组织支架的制备和应用提供了新的思路。
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