紫薇株高相关SAURs、AUX/IAAs基因的克隆与功能分析

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株高是作物、园艺植物和观赏植物的重要性状之一,直接影响到其产量、观赏价值等。紫薇(Lagerstroemia indica)是传统木本花卉,株型形成稳定迅速,是研究株高形成机制的良好材料。课题组前期发现了7个在普通型(高大)、矮生型(矮生)紫薇中差异表达的基因,LfiSAUR1、LfiSAUR39、LfiAUX22在普通型紫薇中上调表达,LfiSAUR26、LfiSAUR31、LfiSAUR50、LfiIAA26在矮生型紫薇中上调表达。在此基础上,本研究对这7个基因进行了克隆,并利用紫薇VIGS体系验证这些基因的功能,初步解析了其在紫薇株高性状调节中的作用。主要结论如下:(1)在普通型和矮生型紫薇中分离了7个候选基因的编码区进行比较,发现普通型、矮生型候选基因编码区上并无序列差异。7个关键基因的长度处于300-800bp之间,均具有完整的开放阅读框。LfiSAUR1、LfiSAUR26、LfiSAUR31、LfiSAUR39、LfiSAUR50的氨基酸序列都具有一个Auxin inducible蛋白保守结构域,LfiAUX22、LfiIAA26的氨基酸序列都具有一个AUX/IAA蛋白保守结构域,与拟南芥(Arabidopsis thaliana)、毛白杨(Populus tomentosa)等植物有高同源性与相似性。(2)为在本源植物中快速验证这7个候选基因的功能,在紫薇中建立了VIGS体系,紫薇VIGS体系漂白表型持续时间可达近2个月。叶背注射法在菌液OD600值为1时,基因沉默效率为60%左右;茎干划伤法在菌液OD600值为2时,基因沉默效率最高约为65%;抽真空法表型出现最早,但表型并不明显,仅出现白色斑点,基因沉默效率为30%左右。(3)利用紫薇VIGS体系对7个候选基因的功能进行初步验证,发现沉默LfiAUX22基因后,沉默株系节间长度出现明显缩短,植株变矮,总体降低10%左右。茎段内的平均细胞长度变短约19.4%,其内的生长素含量明显降低。其它6个基因没有表现出明显的作用。本研究初步确定LfiAUX22是影响紫薇株高性状的重要基因,初步推测LfiAUX22调控了生长素在茎段中的积累,影响了茎段细胞的伸长,从而改变了节间长度,最终导致紫薇株高变矮。
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