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目的:II型糖尿病(Type II diabetes mellitus,T2DM)是一种常见的内分泌代谢疾病,发病率逐年增高,对人类健康和社会经济造成了严重的负担。T2DM的发病机制主要与胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)和胰岛素分泌缺陷相关,而肝脏又是发生胰岛素抵抗的主要器官。因此,靶向缓解肝细胞IR对T2DM的治疗具有重要的临床意义。方法:为了缓解肝细胞的IR,本课题设计并合成了一种新型的载体型纳米酶---Au/Ce/Pt多孔中空纳米球(Au/Ce/Pt porous hollow nanospheres,Au/Ce/Pt PHNPs),其具有强大的类酶活性,同时也可以作为纳米载药体靶向肝细胞递送药物。为了表征所合成的Au/Ce/Pt PHNPs,我们利用透射电子显微镜(Transmission electron microscope,TEM)对其形貌、尺寸以及分散性进行研究;利用扫描透射电镜(Scanning transmission electron microscope,STEM)、X射线能谱(Energy Dispersive Spectrometer,EDS)以及X射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)对其元素组成进行探索;利用动态光散射(Dynamic Light Scattering,DLS)分析其尺寸;利用N2吸附实验分析其孔径。此外,我们还利用超氧歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性检测试剂盒检测了Au/Ce/Pt PHNPs的类酶活性。为了靶向缓解肝细胞IR,首先利用乳糖酸(Lactose acid,LA)对Au/Ce/Pt PHNPs进行功能化的修饰,使其可以特异性地结合肝细胞表面高表达的去唾液酸糖蛋白受体(Asialoglycoprotein receptor,ASGP-R)。然后,利用Au/Ce/Pt PHNPs的类SOD和类CAT的双重酶活性级联清除发生IR的肝组织细胞内过量的活性氧自由基(Reactive oxygen species,ROS)以降低氧化应激(Oxidative stress,OS),进而激活经典的胰岛素信号通路(PI3K/AKT信号通路)并且抑制糖异生信号通路使IR得以缓解。最后,利用Au/Ce/Pt PHNPs多孔中空的物理结构高效率负载双硫仑(Disulfiram,DSF),与Au/Ce/Pt PHNPs的酶活性联合实现双重治疗IR的效果。结果:TEM结果显示Au/Ce/Pt PHNPs是一种表面多孔、内部中空、直径约60 nm的球形纳米颗粒,而且STEM、EDS以及XPS结果证明了其是由Au、Ce和Pt三种元素组成的。催化显色实验和溶解氧定量实验证实了Au/Ce/Pt PHNPs具有强大的类SOD和CAT双重酶活性,能够高效率的级联催化·O2-转变为H2O2以及H2O2分解为H2O和O2的整个反应过程。细胞ROS荧光实验结果显示Au/Ce/Pt PHNPs可以高效率的清除细胞内的ROS。细胞胞吞实验证实了Au/Ce/Pt PHNPs被LA功能化修饰后,可以显著提高其被肝细胞Hep G-2胞吞的效率;蛋白免疫印迹(Western blot,WB)实验证明Au/Ce/Pt PHNPs-LA@DSF可以提高AKT的磷酸化水平并抑制PEPCK的表达水平。IR细胞模型实验证实了Au/Ce/Pt PHNPs-LA@DSF可以在细胞水平显著提高葡萄糖摄取率和糖原合成率。静脉注射后,体内实验结果显示Au/Ce/Pt PHNPs-LA@DSF可以显著降低高脂喂养(High fat diet,HFD)诱导的IR小鼠的血糖,改善糖耐量和胰岛素敏感性。值得注意的是,这些结论在瘦素基因突变的ob/ob小鼠模型中得到了进一步的验证。结论:综上所述,该研究证实了Au/Ce/Pt PHNPs-LA@DSF被成功制备,其可以通过清除ROS以激活胰岛素信号通路和抑制糖异生信号通路进而改善肝细胞IR,并且具有良好的靶向性和治疗效果。因此,Au/Ce/Pt PHNPs载体型纳米酶不仅可以作为载体靶向递送药物,更重要的是其内在酶活性具有极大的IR治疗潜力。