【摘 要】
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目的:1.采用卵清蛋白（Albumin,OVA）全身致敏和鼻部激发构建变态反应相关分泌性中耳炎的BALB/c小鼠模型;2.观察变态反应对于鼻腔-咽鼓管-中耳黏膜病理改变;3.动态观察变态反应迟发相主要细胞因子白介素5（IL-5）及中耳积液相关水通道蛋白5（AQP5）在中耳组织中的表达情况。方法:采用变应原OVA全身基础致敏联合鼻内激发构建变态反应相关的分泌性中耳炎模型。选择清洁级BALB/c小鼠1
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目的:1.采用卵清蛋白（Albumin,OVA）全身致敏和鼻部激发构建变态反应相关分泌性中耳炎的BALB/c小鼠模型;2.观察变态反应对于鼻腔-咽鼓管-中耳黏膜病理改变;3.动态观察变态反应迟发相主要细胞因子白介素5（IL-5）及中耳积液相关水通道蛋白5（AQP5）在中耳组织中的表达情况。方法:采用变应原OVA全身基础致敏联合鼻内激发构建变态反应相关的分泌性中耳炎模型。选择清洁级BALB/c小鼠18只,随机分组空白对照组C、模型组Ⅰ（鼻内激发2周）、模型组Ⅱ（鼻内激发4周）,每组6只。组织HE染色后观察中耳及鼻黏膜组织结构变化以及测量中耳黏膜的厚度;并用免疫组化方法检测各组动物中耳中IL-5和AQP5的表达和变化。结果:OVA经上呼吸道途径致敏构建变态反应相关分泌性中耳炎动物模型,取材组织进行HE染色。对照组C可见咽鼓管黏膜为假复层纤毛上皮,细胞核排列整齐、均匀,纤毛柱状上皮紧密排列及杯状细胞穿插其中。黏膜下层可见致密的纤维结缔组织与软骨紧贴。自咽鼓管内口至鼓膜处中耳鼓室黏膜上皮呈假复层纤毛上皮-单层柱状/立方纤毛上皮-扁平上皮改变。黏膜下层的结缔组织较薄与骨组织紧密相贴。模型组咽鼓管及近咽鼓管处中耳黏膜可见黏膜上皮细胞数目增加,排列紊乱。黏膜下层略微增厚,纤维细胞增多,血管扩张及嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞等浸润。被覆立方上皮及扁平上皮处的中耳黏膜,模型组Ⅰ即滴鼻2周组可见上皮细胞细胞数目增多、排列欠均匀。模型组Ⅱ即滴鼻4周组可见上皮细胞化生,杯状细胞增多,部分纤毛脱落,黏膜下层血管扩张及少量炎性细胞浸润。测量近咽鼓管黏膜、中段中耳鼓室黏膜及鼓膜紧张部三处组织厚度,（1）近咽鼓管黏膜厚度测量:模型组Ⅰ（22.14±4.21um）、模型组Ⅱ（29.25±8.67um）较对照组C（19.31±2.07um）均增厚,模型组Ⅱ较对照组C的黏膜增厚差异有意义（P<0.05）;（2）中段中耳鼓室黏膜测量:模型组Ⅰ（7.06±2.67um）、模型组Ⅱ（9.62±4.02um）较对照组C（5.61±0.78um）增厚,模型组Ⅱ较对照组C的黏膜增厚差异有意义（P<0.05）;（3）鼓膜厚度测量:模型组Ⅰ（7.33±2.5）、模型组Ⅱ（9.31±3.03）较对照组C（5.76±1.07）差异无统计学意义（P>0.05）。变态反应作用时间增多,伴随中耳骨髓腔内IL-5表达明显增加。阳性细胞计数结果:模型组Ⅱ较对照组C多,差异有统计学意义（P<0.05）,模型组Ⅰ与对照组C、模型组Ⅱ的差异无统计意义。免疫组化显示AQP5在小鼠的中耳黏膜和咽鼓管均有表达,中耳鼓室及咽鼓管段黏膜上皮纤毛、基底膜的扁平细胞以及咽鼓管段腺细胞膜表达。模型组较对照组AQP5平均光密度值略有升高,但差别无显著性意义（P>0.05）。结论:本实验采用OVA经上呼吸道致敏的方式成功构建变态反应相关的分泌性中耳炎的动物模型,支持变态反应是分泌性中耳炎发生发展的病因之一。1.过敏原经上呼吸道致敏,从鼻、咽鼓管、中耳黏膜发生较一致的改变,支持了“中耳-咽鼓管-上呼吸道联合体”的学说;2.持续的抗原刺激下,机体内变态反应相关炎性介质等的存在对中耳的黏膜组织的结构造成不可逆的改变,从中耳的局部炎症向慢性中耳炎的转变;3.AQP5在中耳黏膜上皮细胞表达,变态反应对AQP5的表达无相关性。
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