【摘 要】
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[目 的]研究脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后各时间点大鼠的后肢运动功能、损伤严重程度、脱髓鞘变化以及类雪旺细胞（schwann like cells,SCs-like）的表达情况;探究电针（electroacupuncture,EA）治疗对SCI大鼠再髓鞘化的修复作用,为临床应用EA治疗SCI提供更多的理论支持。[方 法]（1）以SPF级健康成年雄性SD大鼠为研究对象,
【基金项目】
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国家自然科学基金（81960817）； 云南省创新团队（2019HC014）；
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[目 的]研究脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后各时间点大鼠的后肢运动功能、损伤严重程度、脱髓鞘变化以及类雪旺细胞（schwann like cells,SCs-like）的表达情况;探究电针（electroacupuncture,EA）治疗对SCI大鼠再髓鞘化的修复作用,为临床应用EA治疗SCI提供更多的理论支持。[方 法]（1）以SPF级健康成年雄性SD大鼠为研究对象,应用Yasargil动脉瘤夹构建SD大鼠T10节段SCI模型。按照随机对照的原则进行分组:Sham组（假手术组）;SCI组（模型组）;SCI+EA组（电针治疗组）。每组30只,再分别设置术后3天（days,d）、7d、14d、21d和28d共计5个时间点。（2）术后第3d开始,SCI+EA组开始给予EA治疗,隔日一次,每次持续30min,直至实验终点。（3）各组用于形态学检测的实验动物于取材前3d开始,经腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5’-bromo-2’-deoxyuridine,BrdU）,用于标记增殖细胞。（4）分别在造模前Id及造模后3d、7d、14d、21d和28d,对各组SD大鼠按照BBB（Basso,Beattie,and Bresnahan locomotor rating scale,BBB）的评分原则与要求进行行为学测试。（5）在结束行为学测试后,分别进行以下实验:①通过苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察比较各组大鼠脊髓的形态结构。②通过勒克司坚牢蓝（luxol fast blue,LFB）染色观察各组大鼠脊髓的脱髓鞘情况。③采用免疫荧光（immunofluorescence,IF）染色法检测各组大鼠脊髓背柱区域中少突胶质细胞（oligodendrocytes,OLs）和SCs-like的表达以及分别与BrdU的共表达情况。④采用蛋白质免疫印迹法（western blotting,WB）检测各组大鼠脊髓中髓鞘蛋白脂蛋白（myelin proteolipid protein,PLP）和髓鞘蛋白零（myelin protein zero,PO or MPZ）两种蛋白的表达量变化。[结 果]（1）BBB后肢运动评价量表的结果显示,与Sham组相比,SCI组大鼠BBB评分降低,后肢运动功能受损,EA治疗升高了 SCI大鼠的BBB评分,改善了运动功能。（2）脊髓大体标本结果显示,与Sham组相比,SCI组早期可见脊髓组织明显夹痕,脊髓硬脊膜下组织明显淤血;后期钳夹处脊髓明显变细,可与周围结缔组织形成粘连。与SCI组相比,SCI+EA组在大体标本上的变化趋势相近。（3）HE染色结果显示,与Sham组相比,SCI组大鼠脊髓组织早期出血坏死、细胞结构紊乱以及炎症细胞浸润,损伤后期持续炎症反应、胶质瘢痕以及脊髓空洞形成。EA治疗降低了大鼠SCI的严重程度、炎症反应减轻以及脊髓空洞化程度降低。（4）LFB染色的结果显示,与Sham组相比,SCI组大鼠明显脱髓鞘,髓鞘排列紊乱,EA治疗降低了 SCI大鼠脊髓脱髓鞘的程度。（5）IF染色结果显示,与Sham组相比,SCI组大鼠脊髓中OLs数量显著降低,损伤后期有SCs-like的表达;同时新生OLs和SCs-like均有增加的趋势;EA治疗增加了SCI大鼠脊髓中SCs-like的数量,但对OLs的总数以及新生OLs和SCs-like的数量无明显影响;（6）WB结果显示,与Sham组相比,SCI大鼠脊髓中P0蛋白的表达量增加,PLP蛋白表达量降低;EA治疗促进了 SCI大鼠脊髓中P0蛋白的表达量的增加,但对PLP蛋白的表达无明显影响。[结 论]（1）EA治疗促进了SCI大鼠后肢运动功能的恢复并促进SCI修复。（2）EA对SCI髓鞘修复可能通过SCs-like的介导参与SCI后早期的再髓鞘化。
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