无鱼油饲料对大黄鱼幼鱼生长和HUFA合成相关基因表达的影响

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本试验利用人工配合饲料(不添加鱼粉和鱼油)对大黄鱼幼鱼进行为期70d的养殖试验,实验结束后,测定了不同个体的生长状况和HUFA含量差异,利用荧光定量PCR技术检测了HUFA合成相关基因的表达情况,并通过转录组测序分析无鱼油饲料饲喂下生长快、慢个体的基因表达差异,旨在通过遗传选育,培育可降低对饲料中鱼粉和鱼油消耗量品系大黄鱼的可能性及探讨其遗传基础。主要研究结果如下:1、采用无鱼油饲料饲喂体重1.75g~5.75 g的大黄鱼幼鱼(1925尾分为6组重量区间依次为1.75g~2.00 g、2.00 g~2.25 g、2.25 g~2.50 g、4.50 g~4.75 g、4.75 g~5.25 g和5.25 g~5.75g 6组,每组145~650尾),经过70 d养殖后,各组间个体生长差异显著(最大个体体重是最小个体的3~4倍以上)表明大黄鱼不同个体营养需求存在显著差异(p<0.05)。2、对照组(添加鱼油)和无鱼油饲料饲养幼鱼,全鱼脂肪酸含量测定结果显示,无鱼油饲料饲喂幼鱼全鱼HUFA含量低于对照组幼鱼全鱼,在无鱼油饲料组内,生长快个体的EPA含量较高、DHA含量较低(p<0.05),但两者之间HUFA总含量差异不显著。3、利用qRT-PCR技术比较研究了对照组和无鱼油饲料饲喂幼鱼脑、肝、胃、肠和肌肉中几种HUFA合成相关基因的表达情况,结果显示:对照组饲喂的大黄鱼幼鱼中的Elovl1、Elovl4、Elovl5、Elovl6和Δ6-Fad 5个基因,表达量最高的组织依次是脑、肝脏,肌肉(表达量最低)。无鱼油饲料饲养条件下,上述基因的表达量乃至表达模式都发生了明显变化,不同基因的变化情况不尽一致。与用对照组饲喂幼鱼相比,在无鱼油饲料饲喂条件下,生长快个体脑中Elovl1和Δ6-Fad、肝中Elovl5、Δ6-Fad和Elovl1、以及胃和肠中Elovl1的表达量均极显著(p<0.01)或显著升高,生长慢个体则以脑、胃和肌肉中Elovl5以及肝脏中的Δ6-Fad表达量升高较显著并高于生长快个体外,其它组织和基因的表达量与对照组差异不大。在无鱼油饲料饲喂条件下,Elovl1、Elovl4和Elovl6基因在生长较快个体各组织中,Elovl5基因在肝(p<0.01)和肠中的表达量均大于生长较慢个体,猜测可能大黄鱼幼鱼在无鱼油饲料饲喂下生长性能可能与这些基因的差异表达有关。4、对初重4.25g~4.75 g组大黄鱼幼鱼,通过无鱼油饲料饲喂65 d后挑选32尾生长较快个体和32尾生长较慢个体,采集其肝组织进行转录组测序分析(Illumina HiSeq X10,150PE模式,每个个体测序6 Gb),经比较,获得差异表达基因共99个,其中在生长快个体组中表达量上调的基因63个,下调的基因有36个。
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