线虫肠细胞中Clathrin非依赖性的hTAC胞吞及后转运研究

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jpy_2008
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细胞自身合成的蛋白等物质并不足维持细胞完整的生命活动,还需要从胞外环境中吸收其他的营养成分加以补充。但是,很多营养成分不能直接穿过质膜到达目的地,需要借助胞吞和囊泡运输将其运输到指定的目的靶位置。胞吞的种类多样,根据囊泡形成的分子基础可以将胞饮分为网格蛋白依赖的胞吞、巨胞饮、小窝介导的胞吞,以及网格蛋白和小窝不依赖的胞吞等类型。  网格蛋白非依赖型胞吞途径(clathrin-independent endocytosis,CIE)作为胞吞作用中的重要一类,与网格蛋白依赖型胞吞途径(clathrin-dependent endocytosis,CDE)相比,目前研究的还不是特别清楚。基于此,本文的主要工作内容是:以整合了CDE内吞模型分子hTfR-GFP和CIE内吞模型分子hTAC-GFP的秀丽隐杆线虫为模型,运用RNA干扰、杂交、质粒注射和基因转化等方法,比较研究clathrin、dynamin、Rab-5等与囊泡形成和转运相关性较大的几种重要调控蛋白在hTfR和hTAC分别示踪的CDE和CIE两种类型胞吞转运途径中调控功能的差异。分别在囊泡形成、脱落、早期转运过程、循环回收过程四个阶段,来阐明hTAC别示踪的CIE型胞吞转运过程中的部分分子调控机制,以及CDE和CIE两种胞吞囊泡转运途径的差异。  通过上述实验,在线虫模型上发现了clathrin和dynamin不参与调控CIE型胞吞小泡的形成和脱落,与之相反,Rab-5蛋白在其胞吞后的转运过程中发挥了重要作用,从而证明了CDE和CIE两种不同类型的胞吞分别以不同的调控机制形成胞吞小泡和使小泡脱落,并通过不同的路径进行早期转运,在早期内含体汇合分选,最后经循环途径将受体回收到质膜。
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