【摘 要】
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目的肥胖是全球重要的公共健康问题。研究表明,花色苷在预防和治疗肥胖中具有一定的作用。本研究从黑果枸杞中分离、提取花色苷,利用体外胰脂肪酶抑制试验和高脂诱导的肥胖动物模型观察黑果枸杞花色苷的降脂作用;并探讨黑果枸杞花色苷降脂作用的可能机制,为证明黑果枸杞花色苷的生物学功能和肥胖的预防和治疗提供新的依据。方法以酸性甲醇从黑果枸杞提取花色苷,pH示差法测测定花色苷浓度,HPLC-MS法分析花色苷主要成分
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目的肥胖是全球重要的公共健康问题。研究表明,花色苷在预防和治疗肥胖中具有一定的作用。本研究从黑果枸杞中分离、提取花色苷,利用体外胰脂肪酶抑制试验和高脂诱导的肥胖动物模型观察黑果枸杞花色苷的降脂作用;并探讨黑果枸杞花色苷降脂作用的可能机制,为证明黑果枸杞花色苷的生物学功能和肥胖的预防和治疗提供新的依据。方法以酸性甲醇从黑果枸杞提取花色苷,pH示差法测测定花色苷浓度,HPLC-MS法分析花色苷主要成分。采用分光光度法测定黑果枸杞花色苷提取物对胰脂肪酶的抑制活性,使用Origin拟合标准曲线计算半抑制浓度IC50。紫外光谱法研究黑果枸杞花色苷提取物对胰脂肪酶结构的影响。荧光光谱法研究计算黑果枸杞花色苷与胰脂肪酶分子间相互作用的热力学参数及分子间作用力。以C57BL/6小鼠和ApoE-/-基因敲除小鼠为研究对象,分为对照组和实验组,均饲喂高脂饲料MD12015,实验组小鼠饮水中添加黑果枸杞花色苷提取物(4 g/L)。试验期为12周,定期称量小鼠体重、摄食量和饮水量;酶法测定小鼠血清中TC,TG,HDL-C,LDL-C的含量;HE染色法观察小鼠肝脏脂质沉积的情况;油红O染色观察小鼠主动脉脂质沉积情况;免疫组化法检测小鼠小肠组织中CD36蛋白的表达情况。结果(1)黑果枸杞花色苷提取物总花色苷含量为26.0±3.6%,主要成分为矮牵牛素-3-O-芸香糖。(2)黑果枸杞花色苷提取物对胰脂肪酶的活性具有一定的抑制作用,半抑制浓度为2.84±0.45 mg/mL,且抑制类型为可逆的竞争性抑制。光谱分析显示黑果枸杞花色苷提取物能使胰脂肪酶肽键C=O基团的π→π*跃迁,α-螺旋含量降低,内源荧光发生猝灭。热力学参数显示黑果枸杞花色苷提取物与胰脂肪酶之间的作用力主要是氢键和范德华力。(3)黑果枸杞花色苷提取物能降低高脂饲料诱导的C57BL/6小鼠和ApoE-/-小鼠体重(P<0.05),降低血脂水平、肝脏中脂肪沉积,降低ApoE-/-小鼠主动脉脂肪沉积斑块面积(P<0.05)。(4)黑果枸杞花色苷提取物能够降低小鼠小肠脂肪酸吸收相关蛋白CD36表达水平(P<0.05)。结论黑果枸杞花色苷提取物能够抑制胰脂肪酶的活性,降低高脂饲料诱导的肥胖小鼠的体重、血清和肝脏中的脂质含量,降低动脉粥样硬化水平,降低小鼠小肠CD36蛋白表达水平,具有作为减肥保健食品或药物的潜力。
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