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第一部分阿霉素诱导大鼠慢性心力衰竭模型建立及评价目的:建立阿霉素诱导的慢性心力衰竭(CHF)大鼠动物模型,并对大鼠心功能和心肌超微结构进行评价。方法:30只成年雄性清洁级Wistar大鼠,随机分为心力衰竭组(CHF组,n=24)和正常对照组(NC组,n=6);CHF组给予阿霉素2mg/kg,腹腔注射,前5次为每3天注射,后5次每7天注射,累计用量为20mg/kg,对照组应用生理盐水同样方法注射,两组均正常饮食喂养;第2、4、6、8周末在CHF组随机各抽取2只大鼠做超声心动图心功能分析和心肌超微病理分析;第10周末应用超声心动图检测剩下大鼠心功能指标;取腔静脉血测定血浆去甲肾上腺素(NE)水平;取左室游离壁心肌,电子显微镜评价大鼠心肌超微结构。结果:CHF组用药4周后即存在心肌开始出现线粒体水肿,心肌间质炎性细胞浸润,第6周出现心肌肥厚,10周后大鼠心肌明显出现线粒体水肿、嵴断裂、核溶解、心肌间质纤维化和心腔扩大、心室壁变薄;第10周末CHF组大鼠左心室舒张末期内径(LVEDD)及收缩末期内径(LVESD)明显增加[(0.58±0.07 )vs (0.45±0.05)和(0.23±0.03) vs (0.05±0.006) ,P <0.05和P <0.01],左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)明显降低[(72.4±2.77)vs (93.51±4.74)和(37.72±5.43) vs (62.21±7.62),均P <0.05];CHF组大鼠静脉血浆NE水平明显高于NC组(13.94±9.61 vs 61.52±21.44,P <0.01)。结论:阿霉素多次腹腔注射可以导致大鼠心肌类似于人类原发性扩张型心肌病的病理和病理生理改变;用阿霉素多次腹腔注射的方法制作CHF动物模型,可靠性和可行性好。第二部分慢性充血性心力衰竭大鼠心肌肾上腺素能受体表达的变化及Carvedilol治疗的影响目的:评价慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌肾上腺素受体(ARs)表达水平的变化及carvedilol治疗对ARs mRNA表达的影响。方法:42只Wistar雄性大鼠随机分成4组,即正常对照组(NC组,n=6)、CHF carvedilol治疗组(CHF-C组,n=12)、CHF metoprolol治疗组(CHF-M组,n=12)和CHF安慰剂治疗组(CHF-P组,n=12);应用阿霉素腹腔注射的方法制作CHF大鼠CHF模型;聚合酶链式反应(PCR)方法测定大鼠心肌ARs mRNA表达水平。结果:⑴和正常对照组相比,CHF-P组和CHF-M组大鼠心肌α1A-AR mRNA表达量明显升高(0.55±0.16 vs 0.32±0.09和0.48±0.14 vs 0.32±0.09,P<0.05);CHF-C组大鼠心肌α1A-AR mRNA表达量明显低于CHF-P组(0.34±0.08 vs0.55±0.16,P<0.05),而与NC组无明显差异(0.34±0.08 vs 0.32±0.09,P>0.05);⑵CHF-P组大鼠心肌β1-AR mRNA表达水平明显低于NC组(0.68±0.18 vs 0.96±0.21,P<0.01),CHF-C组和CHF-M组大鼠心肌β1-AR mRNA表达水平明显高于CHF-P组(0.83±0.18 vs 0.68±0.18和0.78±0.19 vs 0.68±0.18,P<0.05);⑶四组大鼠心肌β2-AR mRNA表达量无明显差异(均P>0.05);⑷CHF-C组大鼠心肌β3-AR mRNA表达量明显低于CHF-P组(0.30±0.09 vs 0.47±0.13,P<0.05),CHF-M组大鼠心肌β3-AR mRNA表达量和CHF-P组比较,无明显差异;⑸CHF-C组大鼠心肌α1A/β1和β3/β1比值与NC组更接近。结论:⑴CHF大鼠α1A-,β1-,β2-和β3-AR表达水平出现明显异常,主要表现为CHF心肌β1-AR表达明显下调和α1A-AR、β3-AR明显上调;⑵carvedilol治疗可使β1-AR水平明显上调,α1A-AR和β3-AR表达水平明显下调,使ARs更接近于正常分布比例,可能有助于改善CHF心肌肾上腺素能受体分布。第三部分慢性心力衰竭大鼠心肌交感神经活性改变及Carvedilol治疗的影响目的测定Carvedilol治疗后慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌神经生长因子(NGF)及酪氨酸羟化酶(TH)表达水平,以评价Carvedilol对CHF大鼠心脏交感神经活性的影响。方法选42只雄性清洁级Wistar大鼠,随机分为慢性心力衰竭组(CHF组,n=36)和正常对照组(NC组,n=6);应用阿霉素腹腔注射的方法制作CHF模型,将CHF大鼠组随机分成Carvedilol治疗组(CHF-C组,n=9)、Metoprolol治疗组(CHF-M组,n=9)、特拉唑嗪治疗组(CHF-T组,n=9)和安慰剂治疗组(CHF-P组,n=9);阿霉素腹腔注射第5周起,CHF-C组接受Carvedilol灌胃治疗(0.25mg/kg/d),CHF-M组接受metoprolol灌胃治疗(0.25mg/kg/d),CHF-T组接受特拉唑嗪治疗(0.4mg/kg/d),CHF-P组用淀粉作安慰剂治疗,疗程6周;高效液相色谱法测定大鼠血浆NE水平;RT-PCR和Western blot方法检测心肌NGF和TH表达水平。结果⑴CHF-P组大鼠心肌NGF mRNA和蛋白表达水平比正常对照组明显下降(0.69±0.17 vs 1.63±0.30和0.52±0.09 vs 1.10±0.29,均P<0.01);⑵CHF-C组NGF mRNA和蛋白的表达明显高于CHF-P组(1.01±0.28 vs 0.69±0.17和0.84±0.24 vs 0.52±0.09,均P<0.05);⑶CHF-T组NGF mRNA和蛋白表达明显高于CHF-P组(0.94±0.23 vs 0.69±0.17和0.81±0.18 vs 0.52±0.09,均P<0.05);⑷CHF-M组NGF mRNA和蛋白与CHF-P组无明显差异(0.77±0.20 vs 0.69±0.17和0.53±0.12 vs 0.52±0.09,均P>0.05);⑸CHF-P组大鼠心肌TH mRNA和蛋白表达水平比正常对照组明显下降(0.94±0.28 vs 1.78±0.49和0.86±0.24 vs 1.42±0.41,均P<0.01);⑹CHF-C组TH mRNA和蛋白的表达明显高于CHF-P组(1.36±0.39 vs 0.94±0.0.28和1.10±0.37 vs 0.86±0.24,均P<0.05);⑺CHF-T组NGF mRNA和蛋白表达明显高于CHF-P组(1.19±0.0.30 vs 0.94±0.28和0.99±0.30 vs 0.86±0.24,均P<0.05);⑻CHF-M组TH mRNA和蛋白与CHF-P组无明显差异(0.97±0.30 vs 0.94±0.28和0.90±0.31 vs 0.86±0.24,均P>0.05)。结论⑴CHF大鼠心肌NGF和TH表达水平明显下降,提示CHF大鼠心脏交感神经活性明显降低;⑵Carvedilol治疗能够阻止CHF大鼠心肌NGF和TH表达下调,有助于提高CHF大鼠心脏交感神经活性。