目的：体外分离培养兔牙髓细胞，研究兔牙髓细胞体外增殖特性及表面标志物的鉴定。方法：酶解组织块法培养兔牙髓原代细胞，有限稀释化克隆培养兔传代细胞，显微镜下观察原代细胞及传代细胞形态变化。取第3-6代细胞进行细胞活率的检测。取2代细胞进行细胞克隆计数。取第2、4、6、8、10代细胞绘制生长曲线。流式细胞仪对第2、4、6、8、10代细胞进行细胞周期的检测。取第2代细胞进行牙髓干细胞表面标志物vimentin、CD44、osteonectin、DSP的鉴定。结果：采用酶解组织块法培养的兔原代牙髓细胞、有限稀释化克隆培养的兔牙髓细胞形态学无明显差异。从第3代到第6代细胞活率细胞数比分别为：94.7%、95.8%、95.2%、95.3%。兔牙髓细胞克隆形成率为8-26个/2000个细胞。不同代细胞之间增殖率有差异，LSD-t检验示第2、4和6代DPCs间无统计学差异，第8代和10代DPCs与其他各代细胞之间的差异均有统计学意义。随着细胞传代，s期细胞比例增加。LSD-t检验示第2、4和6代DPCs的各期细胞比例无统计学差异(P＞0.05)，第8和10代DPCs与其他各代细胞之间均有统计学差异(P＜0.05)。牙髓干细胞表面标志物vimentin、CD44、osteonectin、DSP均为阳性。结论：体外分离培养的兔牙髓细胞具有较强的增殖活性、免疫细胞化学vimentin、CD44、osteonectin、DSP均为阳性表达，证实兔牙髓细胞可分离培养出牙髓干细胞，为牙组织工程提供了新型种子细胞。