【摘 要】
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植物磺肽素（PSK）是近年来发现的一种新型的植物多肽生长调节物质,具有十分广泛的生物活性和作用。它们是两种短肽类物质--磺化的四肽（PSK-β）和五肽（PSK-α）,其结构为[H-Tyr（SO3H）-Ile-Tyr（SO3H）-Thr-OH]和[H-Tyr（SO3H）-Ile-Tyr（SO3H）-Thr-Gln-OH]。1996年,日本学者Matsubayashi等从石刁柏培养细胞的培养液条件化培
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植物磺肽素（PSK）是近年来发现的一种新型的植物多肽生长调节物质,具有十分广泛的生物活性和作用。它们是两种短肽类物质--磺化的四肽（PSK-β）和五肽（PSK-α）,其结构为[H-Tyr（SO3H）-Ile-Tyr（SO3H）-Thr-OH]和[H-Tyr（SO3H）-Ile-Tyr（SO3H）-Thr-Gln-OH]。1996年,日本学者Matsubayashi等从石刁柏培养细胞的培养液条件化培养基（conditionedmedium,CM）中发现了PSK,它可以促进细胞的生长和增殖。然而,国内外关于PSK的研究报告还很少,亟待进行深入和广泛的研究。本文从PSK的化学合成、生理作用、基因表达等方面进行了研究。主要内容如下:1.利用磺化反应将五肽Tyr-Ile-Tyr-Thr-Gln进行磺化,通过柱层析将其磺化产物进行分离,经质谱鉴定,PSK-α合成成功。2.植物细胞的增殖受到起始细胞密度的严格控制,起始细胞密度较低的植物细胞培养体系的建立尤其是一个棘手的问题。由于PSK能够促进悬浮细胞的增殖,我们在进行烟草BY-2转基因细胞系抗除草剂筛选时,在筛选培养基中添加了PSK,结果转基因细胞恢复力大大提高。通过除草剂抗性筛选、PCR和PCR-Southem blotting检测之后,确定获得了转基因细胞系。3.针对小麦PSK前体物基因设计了特异性引物,以SYBR GreenⅠ作为定量检测中荧光染料,采用实时荧光定量PCR法,对小麦幼胚和成熟胚不同时期愈伤组织PSK前体物基因的转录水平进行检测。熔解曲线显示产物特异性较强,无非目的条带和二聚体产生。幼胚愈伤组织中PSK前体物基因转录拷贝数明显高于成熟胚。表明:幼胚愈伤组织再生率高于成熟胚可能与PSK前体物基因的表达有关。
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