【摘 要】
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荧光技术在探索生命科学中发挥了重要作用,随着荧光显微镜的不断升级和时间分辨率的不断提高,荧光探针作为荧光信号的载体在探索生物学以及医学等领域中发挥着越来越重要的作
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荧光技术在探索生命科学中发挥了重要作用,随着荧光显微镜的不断升级和时间分辨率的不断提高,荧光探针作为荧光信号的载体在探索生物学以及医学等领域中发挥着越来越重要的作用。细胞器pH维持在一定的范围内才能保证细胞的正常生理活动,pH的异常变化往往引发一系列疾病,所以探测pH至关重要。为实现亚细胞器内pH的定量检测,本文设计了基于FRET机制,且具有溶酶体靶向性或线粒体靶向性的比率型pH探针BDP-RhB和TBSR-CHO。首先,我们利用BODIPY和还原罗丹明设计了比率型pH探针BDP-RhB。该探针显示出良好的溶酶体定位能力,且有从pH 8.0到4.0的宽响应范围,并伴随着比率值(I582/I518)从0.6到3.4的显着变化,探针同时具备良好的可逆性和稳定性。通过巨噬细胞炎症模型的构建和荧光成像实验,我们利用BDP-RhB可视化指示了炎症过程中巨噬细胞的溶酶体pH的降低。其次,为构建荧光比率加细胞器定位的双功能平台分子,我们以1,3,5-三（叠氮基甲基）苯（T）为核心,以BODIPY,四甲基磺酸罗丹明分别作为信号供体及受体,以4-二苯基膦基苯甲醛作为线粒体靶向及固定基团,构建了pH探针TBSR-CHO,光谱实验表明TBSR-CHO的比率值(I588/I522)随着pH 5.5到8.5的增加由0.9降低到0.2的变化,荧光成像实验证明该探针可以定位并固定在线粒体中,该探针在线粒体pH探测中有巨大潜力。
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