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目的：1.通过对Y-盒结合蛋白1(YB-1)表达的检测,了解其在乳腺癌中的表达情况,探讨其表达与乳腺癌转移等临床特征的关系；2.运用YB-1 shRNA重组载体转染人类乳腺癌细胞株MCF-7,观察乳腺癌细胞中YB-1基因表达下调后,乳腺癌细胞运动、迁移和侵袭能力的变化。方法：1.采用SP法检测50例人乳腺癌组织石蜡标本中YB-1的表达,分析YB-1核定位(活化)与临床特征的相关性以及与细胞中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)以及人表皮生长因子2(Her-2)之间的相关性。2.采用脂质体介导的方法将YB-1基因特异性shRNA及随机片段HK的真核表达载体转染进人乳腺癌MCF-7细胞中,G418抗性筛选获得阳性克隆,RT-PCR和Western blotting检测MCF-7细胞中YB-1mRNA和蛋白表达量的改变；采用细胞划痕实验和Transwell小室分别检测转染前后MCF-7细胞的运动和迁移及侵袭能力的改变；并用RT-PCR、Western blotting及明胶酶谱法电泳分析分别检测转染前后MCF-7细胞中MMP-2mRNA和蛋白表达量及MMP-2蛋白活性的改变。结果：①50例人乳腺癌石蜡标本中,YB-1在所有标本的细胞胞浆中都有表达,而仅在30例标本中有胞核的阳性表达。YB-1在乳腺癌中的核阳性表达与患者的年龄(P=0.529)、肿瘤大小(P=0.917)、TNM分期(P=1.000)、病理分型(P=0.167)等无明显相关性,而与淋巴结的转移显著相关(P=0.001,r=0.523)；YB-1的核阳性表达与患者的ER(P=0.004,r=-0.417)、PR(P=0.002,r=-0.442)及Her-2(P=0.021,r=0.361)表达有明显的相关性。②通过脂质体将HK和YB-1shRNA重组载体(pGensil-1.1/HK,pGensil-1.1/YBX11,pGensil-1.1/YBX12, pGensil-1.1/YBX13)转染进MCF-7后,经G418筛选2周后,获得稳定转染细胞株,依次为MCF-7/HK、MCF-7/Y1、MCF-7/Y2和MCF-7/Y3,RT-PCR检测转染前后MCF-7细胞中YB-1mRNA表达量发现,MCF-7/Y1,MCF-7/Y2和MCF-7/Y3组细胞中YB-1 mRNA表达量较MCF-7/HK和MCF-7组细胞明显降低,并且MCF-7/Y2组细胞中YB-1mRNA表达量明显低于MCF-7/Y1和MCF-7/Y3组,差异有统计学意义(P<0.05),因此选用MCF-7/Y2进行后续实验,并将此组细胞命名为MCF-7/YB-1,而MCF-7和MCF-7/HK组细胞分别作为空白对照组和阴性对照组。Western Blotting检测发现,MCF-7/YB-1组细胞中YB-1蛋白表达量比空白对照组和阴性对照组明显降低。体外划痕实验发现,MCF-7/YB-1组细胞的运动能力较空白对照组和阴性对照组明显降低。Transwell小室实验结果提示,MCF-7/YB-1组细胞的迁移和侵袭能力较空白对照组和阴性对照组明显下降,而两对照组之间无明显差异。随后RT-PCR检测结果显示,MCF-7和MCF-7/HK组细胞中MMP-2mRNA的表达量无明显差异,而MCF-7/YB-1组细胞中MMP-2mRNA的表达量明显低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05)。Western blotting检测结果显示MCF-7/YB-1细胞中MMP-2蛋白的表达比阴性对照组和空白对照组明显降低。而明胶酶谱电泳分析结果显示MCF-7/YB-1组细胞中MMP-2蛋白的活性较对照组明显减弱。结论：①乳腺癌中YB-1的核阳性表达与患者的年龄,肿块大小,TNM分期及病理分型无明显相关性,而与淋巴结的转移呈正相关；YB-1的核阳性表达与ER、PR的表达呈负相关,而与Her-2的表达呈正相关,故YB-1的核阳性表达提示乳腺癌患者预后不良。②转染YB-1特异性shRNA的真核表达载体能减少乳腺癌细胞中YB-1的表达,伴随着YB-1基因沉默后,细胞的运动、迁移和侵袭能力下降,MMP-2基因的转录和蛋白的翻译合成以及MMP-2蛋白的活性也明显降低。这提示YB-1可能通过调控MMP-2的表达来影响细胞的运动、迁移和侵袭。综上,YB-1与乳腺癌的迁移和侵袭密切相关,针对YB-1的基因治疗可能作为恶性肿瘤治疗的新途径。