啤酒酵母β-D-葡聚糖及其衍生物吸附玉米赤霉烯酮(ZEA)的研究

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玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA,F-2)是由玉米赤霉菌、禾谷镰刀菌、三线镰刀菌等真菌所产生的具有雌激素作用的真菌毒素,主要污染玉米、小麦、大麦、燕麦等农作物及动物饲料,具有生殖发育毒性、免疫毒性,对肿瘤发生也有一定影响,对人和动物的健康危害极大。酵母葡聚糖是酵母细胞壁的主要成分之一,具有免疫调节、抗病毒、吸附病原菌及其毒素等多种生物活性。本文对啤酒酵母葡聚糖和交联羧甲基酵母葡聚糖(CCMG)吸附ZEA的性质进行了研究。首先建立了测定ZEA含量的方法-高效液相色谱法。试验优化了分析测定条件。结果表明,本方法具有快速、重现性好和灵敏度高等特点,回收率为92.52%~97.71%,变异系数(CV)为1.14%。用碱法,碱酸法和酶碱法从啤酒废酵母中提取碱不溶性葡聚糖,对产品进行了定性定量分析,纸层析和红外光谱表明产品主要为β-D-葡聚糖,且不含甘露糖。三种产品对ZEA的吸附试验结果表明:酶碱法提取的β-D-葡聚糖对ZEA具有较好的吸附效果,吸附量最大可达到2.296μg/mg葡聚糖。以酶碱法提取的酵母葡聚糖为原料,选用环氧氯丙烷作交联剂,氯乙酸作羧甲基化试剂,在碱催化条件下合成CCMG。以取代度(DS)为试验指标,通过单因素试验和正交试验确定了制备CCMG的较佳条件为:反应温度50℃,反应时间5h,氯乙酸用量3.0g,NaOH浓度50%;在此条件下所得产品取代度为0.5左右。红外光谱分析表明:CCMG的红外光谱图在波数1600CM-1处出现较强的-COO-离子特征吸收峰,1419CM-1出现与羧基相连的次甲基吸收峰,表明其为交联羧甲基葡聚糖。扫描电镜观察,CCMG颗粒联结成团,颗粒表面结构受到破坏,有明显的破损沟纹和很深的洞穴,比表面积增大。吸附试验表明:CCMG对玉米赤霉烯酮具有较好的吸附效果,吸附量最高达到18.643μg/mgCCMG,高于上述酵母葡聚糖的吸附量。
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