常温下溶血程度对人体血清总IgE的影响

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[背景]过敏性休克,在法医学工作中常见的为Ⅰ型过敏反应,主要由免疫球蛋白E(Immuno Globin E,IgE)介导发生,其发病迅速,严重者可危及生命,但对过敏性休克死亡案例的诊断目前主要是依据生前案情调查,既往过敏病史以及濒死期临床表现等,而死后尸检中法医工作者一般仅可见喉头水肿、呼吸道黏液阻塞及肺淤血水肿等非特异性尸体征象,另有部分病例镜检依然只能发现缺乏特异性的病理形态学改变,故对于过敏性休克死亡的法医学诊断是法医学鉴定的一大挑战,主要在排除其他致死性疾病的基础上作出初步诊断,目前对于过敏性休克的诊断并无统一标准。因此在鉴定过敏性休克死亡过程中引入相关的生化指标及研究其变化规律进行辅助诊断具有重要的法医学实际意义。法医实践中尸体血液作为常见检材,尸体冷冻保存及死后变化常导致严重溶血,已有大量研究证明血液溶血后红细胞破裂释放的血红蛋白等物质会对待测指标的检测产生影响。但目前对死后血清总IgE含量随死亡时间的变化规律尚未见报道。[目的]本研究主要对离体人血总血清IgE含量在不同温度及不同溶血程度下的变化规律进行初步探究,以望为过敏性休克死亡及死亡时间估算的法医学鉴定提供较为准确的判断。[方法]本研究主要通过获取正常个体及过敏个体血液,建立溶血程度分级,在不同温度下(常温25℃及-20℃)放置一段时间,利用酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)检测不同溶血程度下的IgE值,观察IgE在不同温度不同溶血程度下的变化规律,用SPSS进行分析比较得出结论。另外比较ELISA法与医院检测方法对实际过敏个体血样血清总IgE值检测的情况。[结果](1)常温下血清总IgE含量呈现先升高后下降的趋势(P<0.05),溶血程度在0~2级时对血清总IgE的检测值的影响较小,溶血程度在0~3级时与血清总IgE浓度存在线性相关(r=0.86),y=0.086x+0.276,但7天后(OD值为7.29-7.76)IgE浓度低于初始值,不可作为诊断过敏的依据;(2)常温下溶血程度与溶血时间存在线性相关(r=0.866),回归方程:y=31.792x+29.739,且不同性别溶血速度无差异;(3)过敏血样血清总IgE吸光度值(optical density,OD)随着冷冻天数的延长总趋势呈下降趋势;-20℃冷冻保存8天肝素锂抗凝管和EDTA-K2抗凝管两者对血清总IgE OD值的检测无影响。[结论]1、常温下可利用血清IgE OD值与溶血程度的回归方程对IgE浓度进行初步估算。2、常温下可利用溶血程度与溶血时间的回归方程对死亡时间进行初步估算。3、过敏血样血清总IgE OD值随着冷冻天数(8天内)的延长总趋势呈下降趋势。
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