论文部分内容阅读
本实验构建了hIL-15-IRES-TK逆转录病毒载体,并证实可有效转染CIK细胞。其转染可使CIK细胞自分泌白介素-15(IL-15)。鉴于逆转录病毒转染具有潜在的导致自身免疫疾病的危险,同时表达的胸苷激酶基因(HSV-TK)可使被转染的CIK细胞在丙氧乌苷(GCV)的处理下能被有效清除。这为hIL-15-TK病毒载体应用于临床CIK细胞过继转移治疗肿瘤的安全性提供了重要的基础。为了观察hIL15-IRES-TK质粒转染的人源T细胞在体内治疗人源胃肠道肿瘤的疗效,我们利用T细胞免疫缺陷小鼠(Balb/c-nu/nu鼠)以人的低分化胃腺癌细胞株BGC-823成功制备了人源胃癌细胞荷瘤小鼠模型,分别以hIL-15-IRES-TK逆转录病毒转染和未转染的CIK细胞在瘤体局部注射,1次/周,共2周,治疗后观察2周。以生理盐水局部注射作为空白对照组。每周测量裸鼠肿瘤体积1次,4周后处死裸鼠,取出肿瘤组织称重。经过2周的治疗,分别注射hIL-15-IRES-TK质粒转染与非转染的CIK细胞的两组荷瘤小鼠的肿瘤体积出现了显著性差异,显示出hIL-15-IRES-TK质粒转染的CIK细胞比非转染的CIK细胞有更强的抑制肿瘤增长的活性。在第3、4周,停止CIK治疗后3组小鼠的肿瘤体积均有所增加,但hIL-15-IRES-TK质粒转染与非转染的CIK细胞组均小于生理盐水组,说明CIK细胞过继转移治疗具备一定的抑制肿瘤细胞的作用。而hIL-15-IRES-TK质粒转染与非转染的CIK细胞两组小鼠的肿瘤体积差异依然显著,显示出hIL-15-IRES-TK质粒转染的CIK细胞比非转染的CIK细胞抑制肿瘤增长的时效更长。在实验过程中IL-15转染CIK组开始治疗后有两只裸鼠肿瘤溃烂,第二周开始溃烂结疤,第四周溃烂愈合,肿瘤消失。对照组与CIK组则无此现象出现。这一现象也侧面证实了IL-15-IRES-TK质粒转染的CIK细胞比非转染的CIK细胞具备更强和更持续的杀瘤效应。结论:实验表明CIK细胞可以有效抑制胃腺癌细胞株BGC-823在体内的生长,而hIL-15-IRES-TK质粒转染的CIK细胞不仅可以抑瘤,还可以致肿瘤消退。