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胃癌（Gastric cancer,GC）是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,据2020年全球癌症统计数据显示,当年新增病例超过100万例,预计有76.9万人死于胃癌。由于早期胃癌缺乏典型的临床症状以及缺乏早期检测和治疗的生物标志物,所以部分患者确诊时病程已达晚期。因此,探索胃癌发生和转移的分子机制,寻找有效预测胃癌的分子生物标志物,对于提高胃癌患者诊断率及改善预后至关重要。国内外研究证实,T细胞淋巴瘤侵袭转移诱导基因-1（T-lymphom invasion and metastasis gene 1,TIAM1）与胃癌的增殖、迁移及侵袭密切相关。但目前关于TIAM1活性调控的研究尚不充分。前期实验证明miR-10b-5p在体外通过下调TIAM1的表达从而抑制胃癌的进展。但在体内是否同样抑制胃癌的增殖转移尚不明确。前人研究表明TIAM1蛋白受到泛素蛋白酶体系统的调控。E3泛素连接酶底物衔接蛋白斑点型POZ蛋白（Speckle-type POZ domain protein,SPOP）可通过识别SPOP降解决定子（SPOP-binding consensus,SBC）结合并泛素化降解底物蛋白,SPOP基因的突变或蛋白质表达的异常与多种癌症的发生和进展有关。TIAM1蛋白的氨基酸序列包含一个SBC区域,从而本文得出假说,SPOP可以泛素化调控TIAM1蛋白的活性从而影响胃癌的生物学行为。为确定miR-10b-5p和SPOP通过调控TIAM1的表达和活性进而影响胃癌的增殖和转移,本研究首先采用双荧光素酶实验、克隆形成实验、CCK-8增殖实验和划痕愈合实验验证miR-10b-5p在体外培养的细胞中通过靶向下调TIAM1的表达抑制胃癌细胞的增殖和迁移。另外,通过构建裸鼠胃癌移植瘤模型,证实在体内miR-10b-5p可以显著抑制胃癌移植瘤的增殖和转移。然后通过免疫共沉淀实验、Ni-NTA泛素实验、蛋白降解实验和蛋白半衰期实验证明Cullin3-SPOP泛素化调控TIAM1蛋白。在人胃组织标本中采用RT-q PCR、免疫组织化学染色实验检测癌及癌旁正常组织中TIAM1及SPOP mRNA及蛋白表达,并分析两者表达相关性以及与胃癌TNM分期、淋巴结转移的相关性,结果表明在胃癌组织中,SPOP在胃癌组织中mRNA水平及蛋白表达水平均低于癌旁5cm的正常组织,与TIAM1表达呈负相关。此外,慢病毒包装构建稳定表达SPOP野生型及突变型的胃癌细胞,并进行克隆形成实验、CCK-8增殖实验、划痕愈合实验、Transwell侵袭实验。结果表明与野生型SPOP相比,SPOP突变后导致胃癌细胞具有更强的增殖、迁移和侵袭能力。与对照组相比,在SPOP突变细胞系中稳定敲低TIAM1后胃癌细胞的克隆形成数量减少,增殖速度降低,划痕愈合率降低,穿过Transwell基质胶膜的细胞数量显著减少（以上差异均具有统计学意义）。说明TIAM1敲低后抑制了SPOP突变胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭行为。综上,实验结果表明miR-10b-5p通过靶向下调TIAM1的表达抑制胃癌的增殖和转移,Cullin3-SPOP通过泛素化修饰TIAM1调控其活性进而抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。本研究的创新点在于体内实验中验证了miR-10b-5p通过调控TIAM1抑制胃癌的进展,并且证明了TIAM1蛋白是SPOP的新底物。阐明了TIAM1调控影响胃癌增殖、迁移及侵袭的新机制,为临床胃癌的诊断及治疗提供新的标志物和靶点。