针刺治疗脑卒中后认知功能障碍的系统评价及分子机制研究

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目的1通过系统评价针刺治疗脑卒中后认知功能障碍(post stroke cognitive impairment, PSCI)的临床研究疗效,为针刺治疗PSCI的临床应用提供循证医学依据。2通过动物实验研究针刺对脑缺血再灌注损伤后大鼠认知功能障碍的疗效及其与磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B (phosphoinositide-3-kinase/protein kinase B, PI3K/Akt)信号转导通路的关系,探讨针刺治疗PSCI机制,为针刺治疗PSCI提供实验依据。方法1系统评价使用Meta分析的方法对针刺治疗PSCI的临床研究的科研设计质量进行严格的评价、分析,对针刺治疗PSCI的临床疗效进行系统评价。2实验研究实验动物分组,随机分为假手术组、电针组和模型组。对电针组和模型组用改良线栓大脑中动脉梗塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)建立局灶性缺血再灌注损伤认知功能障碍的模型。采用行为学、Morris水迷宫观察电针对脑缺血再灌注损伤大鼠认知功能的影响;TTC染色观察电针对大鼠脑梗塞体积的影响;TUNEL检测脑皮质中细胞凋亡的变化;Western Blot检测法观察脑皮质组织中PI3K/Akt及其下游p-Akt、 Bcl-2、 Bax蛋白的表达;RT-PCR技术检测其基因调控机制。结果1系统评价结果经严格评价分析,本研究纳入42个临床试验,共3088例PSCI患者,分别对针刺疗法干预PSCI的MMSE、 NCSE及P300进行合并,Meta分析显示电针组疗效均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。根据取穴百会穴和神庭穴的情况亚组分析显示取穴含百会穴或百会、神庭穴的电针组疗效均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而取穴不含百会、神庭穴的电针组较对照组差异无统计学意义(P>0.05)。2实验研究结果通过制作改良线栓MCAO动物模型,从神经行为学及Morris结果看电针组较模型组逃避潜伏期明显缩短而穿越平台的次数明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);TTC结果显示电针组大鼠脑梗塞体积小于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);TUNEL检测缺血再灌注后凋亡神经细胞,电针组与模型组比较有统计学意义(P<0.05); Western Blot和RT-PCR观察大鼠脑皮质组织PI3K/Akt蛋白及其下游蛋白,发现电针组较模型组PI3K及p-Akt的蛋白表达均明显升高,Bcl-2表达明显升高,Bax表达明显降低。说明电针百会、神庭可明显减少大鼠脑缺血再灌注损伤区域神经细胞凋亡,促进神经细胞的修复,改善脑缺血再灌注损伤后认知功能障碍大鼠的认知功能。结论1针刺疗法可有效改善PSCI的认知功能。针刺取百会、神庭穴可有效改善PSCI患者的认知功能,然而对于PSCI的诊断标准和评价指标有待进一步规范、统一,且针刺干预PSCI的临床研究的方法学有待进一步提高。2电针百会、神庭可以改善局灶性脑缺血再灌注损伤认知功能障碍大鼠的认知功能,且对缺血损伤脑组织具有神经保护作用,通过激活PI3K/Akt信号转导通路而拮抗细胞凋亡可能是其作用的机制之一。
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