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目的:研究利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(GeneXpert MTB/RIF)在儿童结核病中的诊断价值。方法:对2018年1月至2019年5月在重庆医科大学附属儿童医院住院的265例疑似结核病患儿进行回顾性研究,将Xpert MTB/RIF、涂片显微镜检查、T-SPOT、TST、结核分枝杆菌培养诊断儿童结核病的灵敏度及特异度进行比较,并分析Xpert MTB/RIF的诊断价值。结果:265例疑似结核病患儿中,诊断出结核病患儿153例,非结核患儿112例。Xpert MTB/RIF、涂片检查、T-SPOT、TST、结核分枝杆菌培养对结核病诊断的灵敏度分别为32.0%、29.8%、86.2%、69.6%、25.4%(P<0.05),差异具有统计学意义;特异度为100%、100%、96.9%、91.9%、100%;阳性预测值为100%、100%、97.8%、93.1%、97.2%;阴性预测值为51.9%、48.0%、81.7%、65.8%、35.2%。Xpert MTB/RIF在痰液、胃液、脑脊液、灌洗液及其他标本(脓液、尿液、大便、胸水、腹水等)中的灵敏度分别为25.3%、21.7%、21.2%、32.1%、32%(P=0.800);痰液、胃液、脑脊液、灌洗液及其他标本中涂片检查的灵敏度分别为15.9%、12.9%、10.2%、15.4%、33.3%(P<0.05)。≤5岁组的Xpert MTB/RIF、涂片检查、T-SPOT、TST和结核分枝杆菌培养的灵敏度分别为34.0%、23.9%、82.6%、69.0%、37.8%;>5岁组的XpertMTB/RIF、涂片检查、T-SPOT、TST和结核分枝杆菌培养的灵敏度分别为31.1%、32.4%、87.7%、69.9%、19.4%。对于涂片阳性及培养阳性的患儿,Xpert MTB/RIF诊断结核病的灵敏度分别为48.9%和62.9%,明显高于以临床诊断为标准的灵敏度(32%),且差异有统计学意义。结论:在几种结核病诊断方法中,T-SPOT的灵敏度及特异度均较高,Xpert MTB/RIF、涂片检查、结核分枝杆菌培养的特异度较高,但灵敏度显著低于T-SPOT及TST。证明Xpert MTB/RIF在儿童结核病的诊断中并没有明显的优势。