保存方法对同种异体软骨移植物免疫原性的影响

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目的比较慢速梯度降温法、Co60射线照射+梯度降温法及玻璃化法等保存方法对同种异体骨软骨移植物免疫原性的影响,以此选择一种最佳保存方法,为提高同种异体骨软骨移植手术成功率奠定基础。方法将获得的新鲜异体骨软块随机分为4组,即A组:对照组(不采取任何措施);B组:慢速梯度降温组;C组:玻璃化组;D组:Co60射线照射+梯度降温组。每组骨软骨块标本160个,分为两部分。一部分直接保存,保存8d、15d、30d、60d时各取出标本10枚,将软骨细胞分离培养,制成细胞悬液;另一部分用同样方法保存,制成细胞悬液后同IFN-γ混合,诱导出MHC-II。以上两部分标本的细胞悬液分别用二抗法标记细胞表面的MHC-I,MHC-II,利用流式细胞仪技术测定其保存后的抗原表达率。结果1.经过保存后,B,C,D组软骨细胞表面的MHC-I类抗原表达率有大幅度下降,但各组间没有显著性差异(P>0.05),与A组有明显显著性差异(P﹤0.05)。2.经过IFN-γ诱导后,各组标本软骨细胞表面可以表达MHC-II类抗原,B,C,D组软骨细胞表面的MHC-II类抗原表达率有大幅度下降,但各组间没有显著性差异(P>0.05),与A组有明显显著性差异(P﹤0.05)。3.经过保存后,B,C,D组MHC-I类抗原和MHC-2类抗原表达率均随着时间的推移下降,但各组均在30天和60天的抗原表达率没有显著性差异(P>0.05)。结论1.经过各种方法保存后,同种异体软骨的免疫原性均有大幅度的降低,预示可能会提高同种异体骨软骨移植手术的成功率。2.慢速梯度降温法,Co60射线照射+慢速梯度降温法及玻璃化法保存同种异体骨软骨移植物降低关节软骨的免疫原性没有显著性差异。3.各种方法保存同种异体软骨的免疫原性在30天时和60天时没有显著性差异。
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