在传统的抗病毒免疫机制中,干扰素(IFN)总是最为活跃的蛋白质分子,在低等脊椎动物中也不例外。草鱼(Ctenopharyngodon idellus)在双链RNA病毒类似物poly I:C刺激后会激活固有免疫应答,导致IFN Ⅰ的大量表达及分泌,目前干扰素已经成为人们寻求草鱼疾病治疗方案的一个靶点。丝氨酸/苏氨酸激酶38(STK38)和糖原合酶激酶3β(GSK3β)均属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族的成员,在哺乳动物中,已经报道了两者在Toll-like受体信号传导过程中的重要作用。为了研究鱼类STK38和GSK3β在TLR3介导的先天免疫信号通路中的作用。我们克隆得到了草鱼STK38基因,其全长cDNA为1967bp,其中5’UTR为502bp,3,UTR为382bp,开放阅读框为1083bp,编码一个蛋白质包含一个N端的S_TKc激酶结构域和一个C端的S_TK_X结构域。系统进化树分析金线鲃STK38和草鱼的亲源性较近。用poly I:C刺激草鱼组织和草鱼肾细胞(CIK细胞),不管是在组织中还是细胞中CiSTK38均有响应,并在刺激6h时表达水平达到最高,在免疫器官中响应幅度较大,变化趋势也较为明显。说明鱼类中的STK38可以对poly I:C刺激作出应答。GSK3β的功能涉及到许多维持细胞正常生命活动的信号通路,由于其功能的广泛性,也使得GSK3β有时出现在细胞质中,有时进入到细胞核里,为了了解其和STK38在相互作用时的亚细胞定位,用GFP标签对其定位研究,结果显示单独转染时CiSTK38和CiGSK3β均在细胞质中大量分布,只有少部分存在于细胞核里。而共定位结果显示CiSTK38和CiGSK3β均出现在细胞核里,这可能与他们的功能有关。为了进一步研究CiSTK38参与先天免疫的作用机制,我们利用GST-pulldown实验和免疫共沉淀实验证明了 CiSTK38和CiGSK3β可以相互作用。过表达和敲低CiSTK38,CiGSK3β的表达水平没有明显变化,但phos-tag聚丙烯酰胺凝胶电泳检测表明CiSTK38可以降低CiGSK3β的磷酸化水平从而赋予CiGSK3β的激酶活性。通过在CIK细胞中过表达和干扰实验证明了 CiSTK38是通过CiGSK3β去调控IFN Ⅰ的表达,而且CiGSK3β的激酶活性对IFN Ⅰ的调节显得尤为重要。综上所述,CiSTK38对IFN Ⅰ的调控是由CiGSK3β介导的。