流感病毒是一种可导致人类和动物的严重呼吸道感染的传染性病原体,持续对公共健康构成威胁。为了解流感病毒的致病机理,使用体外细胞模型和小型哺乳动物模型已变得不可或缺。然而,目前在实验室环境中使用的细胞系和动物模型或多或少存在缺陷和不足。唾液酸转移酶（Sialyltransferase,ST）调控生成的唾液酸受体与病毒血凝素相互作用合是流感病毒有效感染和传播的关键,但在常见细胞系和流感动物模型中存在唾液酸受体及ST底物（CMP-唾液酸）与人类差异较大等诸多不足,不能准确地反映人类流感疾病的特征。本研究选取9株常用细胞株（MDCK、BHK、HEP-2、16HBE、A549、Vero、CHO-k1、DF-1和293T）,通过半数组织感染剂量(TCID50)比较人/禽流感病毒在不同细胞系中的生长复制水平;应用直接免疫荧光法检测细胞表面唾液酸受体分布及其与流感病毒的结合;通过荧光定量RT-PCR方法检测唾液酸转移酶（ST3GALⅣ;ST6GALⅠ）m RNA转录水平。结果显示,9株细胞系均含有唾液酸,其中MDCK和DF-1细胞唾液酸转移酶表达水平最高,表面唾液酸最丰富,结合病毒量最大,对流感病毒敏感性高;BHK细胞唾液酸含量最低,可结合的流感病毒量最少,对流感病毒敏感性低。9种实验室常用细胞系中,唾液酸转移酶基因表达水平、细胞表面唾液酸含量与结合的流感病毒量呈正相关。前期研究中发现树鼩能够有效感染流感病毒,具有较好的症状模拟性,其ST基因序列和唾液酸受体较原有模型动物在分布上与人类更为近。在此基础上,本课题通过检测树鼩呼吸道组织ST表达,选取与流感病毒相关的ST基因（ST3GALⅠ/Ⅳ;ST6GALⅠ）并构建其表达质粒转染BHK细胞,筛选出树鼩ST基因稳定表达细胞系,并初步分析重组细胞与流感病毒地相互作用。分别应用Reel-time PCR方法检测唾液酸转移酶（ST3GALⅠ/Ⅳ;ST6GALⅠ）m RNA转录水平和Western blot法检测目标蛋白表达,证明树鼩ST在基因和蛋白水平在BHK细胞中表达。应用直接免疫荧光法检测细胞表面唾液酸受体,重组细胞BHK-tu STs细胞表面唾液酸流感受体明显增多。半数组织感染剂量(TCID50)比较人/禽流感病毒在BHK-tu STs中的12 h、24 h、48 h、72 h生长复制水平,以及人/禽流感病毒对BHK-tu STs细胞蚀斑实验,共同证明BHK-tu STs重组细胞对流感病毒嗜性和感染复制效率较原BHK细胞株均显增强。综上结果,从细胞水平验证树鼩ST在功能上能有效介导流感病毒的粘附和复制,为进一步阐明树鼩是作为流感动物模型提供重要的科学依据。