硒是一种重要的微量元素，适量的硒能预防疾病、延缓衰老、抵抗多种外界胁迫对机体造成的损害，过量的硒则会有毒害作用，因此，探讨植物对硒耐受机制，找出真正的植物耐硒关键因子具有重要的理论意义和实践价值。本文从化学激活型XVE系统中筛选出功能缺失型突变体vse2，鉴定其对硒有一定的耐受性，通过Tail-PCR技术克隆该基因，并初步解析该基因调控硒耐受的分子机理。结果如下:　　1.从拟南芥XVE突变体库中，筛选获得耐硒突变体vse2，在30μNa2SeO3和10μMβ-estradio+30μM Na2SeO3的培养基中，突变体vse2均表现出耐硒性状，说明突变体vse2对硒的耐受性与β-estradiol无关。　　2.利用Tail-PCR技术，克隆了拟南芥VSE2基因，该基因为TPS22(At1g33750)，编码一个可能的萜类合成酶，T-DNA插入TPS22基因起始密码子ATG下游第一个外显子的第29个碱基处。基因同源性和氨基酸序列比对的结果显示，TPS22基因有较高的保守性，并且与琴叶拟南芥有较高的相似性。　　3.TPS22基因在突变体vse2中表达量降低，说明该突变体是基因敲除型突变体。另外，TPS22基因在不同组织中表达量水平有差异性，在根中表达量最高，在花中表达量最低。　　4.硒胁迫下，突变体vse2根部和茎部组织中的硒含量均较WT低，同时检测了磷转运体PHT1;1，发现PHT1;1在突变体vse2中的表达量也降低，推测突变体vse2体内积累较少的硒与其转运体减少有关。　　5.硒代半胱氨酸甲基化转移酶SMT基因在突变体vse2中的表达量较高，推测突变体vse2中硒代半胱氨酸转变为硒代甲基半胱氨酸，减少了硒蛋白的毒性。　　6.硒胁迫下，突变体vse2中GPX1基因表达和GPX活性上升，说明突变体vse2清除胁迫产生的活性氧能力提高。　　7.硒胁迫下，当培养基中加入BSO时，突变体vse2对硒的耐受性消失;且突变体vse2中的GSH含量和GSH1基因表达量均升高，说明突变体vse2对硒的耐受性部分依赖GSH途径。　　8.进一步检测CTK含量和相关基因IPT、TPS25基因的表达量，发现硒胁迫下，CTK含量增加，同时IPT、TPS25基因的表达量上升，推测CTK含量上升，与相关基因IPT、TPS25表达量上升有关。　　9.耐硒突变体vse2对干旱、甘露醇、低温胁迫敏感。　　综上所述，TPS22基因介导硒耐受的分子机制可能是:1、硒胁迫下，突变体vse2中磷转运体PHT1;1基因表达量降低，使得进入突变体中的硒较少，减少了过量的硒对植物的伤害。另外，突变体通过高水平的表达SMT和GPX基因，减少错误硒蛋白的插入，增强GPX活性，提高了突变体vse2清除H2O2能力，增加突变体对硒的耐受性。2、TPS22介导的硒耐受部分依赖GSH途径。3、突变体TPSS基因的下调，引起异戊烯基转移酶和萜类合酶相关基因的表达水平增强，使细胞分裂素含量上升，提高了突变体的抗逆能力。　　另外，TPS22基因下调，使得突变体vse2对干旱、低温、渗透胁迫敏感。