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目的 应用贝特舒滴眼液对急性高眼压的兔眼进行治疗,通过视网膜神经细胞的凋亡检测和电镜观察超微结构的改变,来了解贝特舒滴眼液对青光眼视网膜神经节细胞的保护作用。 方法 大耳白兔12只,随机分成2组:给药组A和不给药组B。A组内再分2组,每只兔选一眼作高眼压灌注,为A2组,对侧眼作为对照组A1;同样,B组内也分2组,选一眼作急性高眼压模型组B2,对侧眼作为对照组B1。动物称重、麻醉后随机选一只眼,用连接生理盐水瓶及输液管的7号针头沿角膜缘作前房穿刺,升高输液瓶至距动物垂直距离为136cm处,此高度可形成100mmHg压力,维持60分钟。灌注前2小时,B组予贝特舒滴眼液点眼,灌注结束后按照说明予2滴/12小时,共3天;A组不予贝特舒治疗。3天后耳缘静脉注气法处死动物,摘取眼球,并去除角膜、虹膜、晶状体、玻璃体,把眼球壁固定、切片,各组分别进行视网膜神经细胞凋亡检测(用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术,即TUNEL技术)和电镜观察视网膜神经节细胞超微结构的变化,计数每个高倍镜视野中染色阳性的细胞数,经过统计学处理,比较各组的差异。 结 果 在A。组和B。组中,可以观察到染色阳性的细胞,细胞核呈棕黄色,主要分布在视网膜的内核层和节细胞层人;与A。组没有找到染色阳性细胞。每个高倍镜视野下,阳性细胞数经过统计学处理,比较结果如下小。组与A。组比较,阳性细胞数减少O=2.666人咖=2·57八P<0.「L说明贝特舒滴眼液点眼有防止高眼压导致视网膜神经节细胞凋亡发生的作用3B。与A;组比较,阳性细胞数增多(t=8.696,to。l5=6.869,P<0.001),说明贝特舒滴眼液局部点眼不能完全阻止视网膜神经节细胞凋亡的发生;A:与A;组比较,阳性细胞数增多(t=10.826人。;。=6.869,P<0.001入说明高眼压可以导致视网膜神经节细胞凋亡止;与B;组比较,差异无显著性*=0,P一入说明贝特舒滴眼液无毒性作用,不能导致视网膜神经节细胞凋亡;B。与B;组比较,阳性细胞数增多(t=8.696,to。;。=6.869,P<0.001),说明即使局部使用贝特舒滴眼液,高眼压仍会导致视网膜神经节细胞凋亡的发生。电镜观察的结果:A;人;组中视网膜神经节细胞核大,呈圆形或椭圆形,有典型的双层核膜,胞质中粗面型内质网丰富,有颗粒状核糖体附着,线粒体脊清晰k。组中线粒体高度肿胀,脊大部分消失,空泡化,部分膜破裂,内腔出现细小致密物,粗面型内质网肿胀,脱颗粒出。组少部分线粒体肿胀,部分脊肿胀变短,极少数有空泡变,粗面型内质网末见明显扩张。 结 论 高眼压能导致视网膜神经节细胞发生凋亡,而贝特舒滴眼液 .t.能部分地阻止其凋亡的发生,贝特舒滴眼液对视网膜神经细胞没有毒性作用。