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目的 （1）构建人骨形态发生蛋白7（hBMP-7）逆转录病毒载体并制备重组病毒液，检测经逆转录病毒介导hBMP基因转染的兔骨髓基质干细胞（BMSc）中外源hBMP-7 mRNA和蛋白的表达。（2）探讨hBMP-7基因转染对BMSc增殖和向成骨细胞分化的调节作用。（3）对重组病毒液和经基因转染的BMSc与左旋聚丙交酯（Poly-L-lactide，PLLA）生物材料复合后修复兔桡骨1.5cm缺损的能力进行评价，从而探讨基因转移技术在骨组织工程中应用的可行性，并建立利用经hBMP基因转染的BMSc构建组织工程化骨组织的方法。 方法 （1）采用粘-粘端连接法构建hBMP-7逆转录病毒载体（PLNCX2-hBMP7），利用脂质体介导的基因转移技术转染包装细胞PT67，经G418筛选后，制备含hBMP-7目的基因的重组逆转录病毒液，病毒液感染兔骨髓基质干细胞，使用原位杂交、RT-PCR以及免疫组织化学的方法检测hBMP-7在BMSc中的表达。（2）采用MTT法、流式细胞仪对比分析经转染与未经转染BMSc的增殖情况，NPP法检测细胞碱性磷酸酶（ALP）合成情况，3H脯氨酸掺入方法检测胶原合成情况，放射免疫方法测定细胞骨钙素（BGP）、层粘连蛋白合成情况。（3）制备新西兰大白兔桡骨1.5cm缺损实验模型，病毒液修复实验分为4组：PLNCX2-BMP7+PLLA修复组：PLNCX2+PLLA修复组；单纯PLLA生物材料修复组；空白组，未加任何填充材料，于术后采用大体观察、X线观察、组织学观察方法对骨缺损修复情况进行对比检测。（4）将制备的病毒液转染BMSc，利用经转染的BMSc修复兔桡骨1.5cm骨缺损。修复实验也分为4组：经转染细胞+PLLA修复组；未经转染细胞+PLLA修复组；单纯PLLA生物材料修复组；空白组，未加任何填充材料。采用大体观察、X线观察、组织学观察、免疫组织化学等方法对骨缺损修复情况进行对比检测。 结果 （1）构建的hBMP-7逆转录病毒载体中外源基因方向、序列均正确、无碱基缺失及突变现象。原位杂交、RT-PCR以及免疫组织化学检测显示经I，TreunXZ－BMP病毒液感染的BMS。中有较强的阳性结果出现，而PLNCX。空载体转染的BMS。以及未转染的BMSC中极少见阳性表达结果。G)经 PLNCXZoMP病毒介导的基因转染的兔 BMSC增殖能力无明显改变，同时其合成胶原、ALP、BGP、层粘连蛋白的能力能够得到显著提高，与PLNCXZ病毒液转染、未经转染的BMS。相比有显著性差异。D)PLNCXZEMP重组病毒液与 PLLA生物材料复合修复组可见在缺损处有骨性连接形成，组织学观察见有大量新生骨组织形成，而PLNCX。病毒液＋PLLA修复组、单纯材料修复组和未修复组均未见骨性连接形成，仅在部分骨缺损两断段形成少量骨组织。（4）大体观察、X线、组织学检测分析结果初步证实经转染的BMSc修复骨缺损的成骨速度和成骨量均优于未转染BMSc修复组，单纯PLLA生物材料修复组和空白组中均未见骨缺损得到修复。 结 论（1）采用逆转录病毒介导的方法可以将 hBMP．7转染至BMSC中，并有外源hBMP7的表达。＊)PLNCX。HMP7基因转染能够促进体外培养的BMS。向成骨细胞转化，并对其增殖能力没有显著影响。 3)采用 PLNCXZEMP重组病毒液与生物材料复合的方法能够修复兔侥骨 1．scm缺损。（4）PLNCX。－BMP基因转染能够提高 BMSc形成组织工程化骨组织和修复骨缺损的能力。（5）采用基因转染的方法能够提高BMS。体内外成骨能力，可用于以BMSC为种子细胞的组织工程化骨组织的构建和进一步应用。