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缺血再灌注后神经细胞死亡有坏死和凋亡两种形式，其中缺血中心区主要以细胞坏死为主，是不可逆的，缺血半暗带区主要以凋亡为主，如能及时恢复血液循环则凋亡是可逆的，所以缺血半暗带是目前缺血性脑血管病的研究热点，这一区域细胞的自发电活动和诱发电活动消失，但尚可维持细胞的膜电位及内外离子环境的稳定性。虽然这一区域脑组织暂时丧失了生理机能，但细胞形态的完整性未受到破坏，仍存在生机，并可诱发细胞产生系列反应，部分表现为细胞生物信息改变，包括基因和蛋白表达的改变。AIF和Caspase-3是细胞DNA损伤后非常重要的反应蛋白，当DNA遭受外来损伤时，以上两种蛋白被激活而表达增加，引起染色质的凝聚和DNA的裂解，从而导致细胞凋亡。本文就AIF和Caspase-3在脑缺血损伤过程中的变化以下几个方面的探讨：研究目的1．探讨大鼠局造性脑缺血再灌注后凋亡诱导因子表达的时空分布规律及与神经细胞凋亡的关系。2．探讨海风藤提取物在缺血性脑损伤中对神经细胞凋亡的影响。研究方法1．应用线栓法建立Wistar大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型；同时采用TTC染色观察梗死灶的分布。2．应用原位末端标记(TUNEL)的方法观察缺血再灌注不同时间点神经细胞凋亡的出现和分布规律。3．应用免疫组化技术分别观察脑缺血再灌注后AIF和Caspase-3的表达变化。4．制备海风藤提取物，观察其对Caspase-3和AIF及神经细胞凋亡的影响。研究结果1．缺血后缺血侧鼠脑肿胀，有明显的梗死灶形成，TTC染色显示正常脑组织呈红色，梗死灶脑组织呈苍白色。2．TUNEL阳性染色为细胞核呈紫蓝色颗粒，主要见于缺血灶周围区，再灌注3h开始升高，再灌注6h、24h后进一步增加，72h有所下降。3．在不同缺血再灌注时间点的病灶周围可见AIF阳性表达细胞，其时空分布规律与TUNEL阳性细胞基本一致。4．海风藤提取物干预后，缺血灶周围区不同时间点AIF阳性细胞、Caspase-3阳性细胞及凋亡神经细胞表达数量均明显减少。研究结论1．凋亡诱导因子(AIF)在脑缺血再灌注后神经细胞的凋亡过程中发挥了重要作用。2．海风藤提取物可以减少神经细胞凋亡，发挥缺血性脑损伤的保护作用。