脂肪干细胞来源的神经祖细胞移植治疗坐骨神经损伤的研究

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目的:研究体外培养的脂肪干细胞(ADSCs)来源的神经祖细胞移植治疗坐骨神经损伤的可行性,初步探讨其可能机制。  方法:⑴在含20ng/ml EGF,20ng/ml FGF-2,2%B27的无血清培养基中培养大鼠ADSCs,传至第2代,用携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒转染ADSCs,继续传代至第4-5代时将其诱导形成神经祖细胞。  ⑵将42只大鼠随机分为两组,每组21只。移植组:采用钳夹法建立坐骨神经损伤模型,神经膜下注射带GFP标记的ADSCs源性的神经祖细胞。对照组:注入同等量的细胞悬浮液。  ⑶检测指标包括:①术后每周进行大鼠步态分析测量坐骨神经功能指数(SFI),共6周。②术后每周行肌电图检查测量坐骨神经运动神经传导速度(MCV)及肌肉复合动作电位波幅(CMAP)的检查,共6周。③术后第6周测量腓肠肌湿重比。④取移植组术后1天、7天、14天、21天、28天、35天、42天的标本进行GFP的检测,确定移植细胞的存活状态。⑤术后6周对损伤区域移植细胞进行施万细胞标记物(GFAP)的检测,并与GFP进行双标检测,以确定移植细胞是否分化。  结果:术后4-6周移植组坐骨神经功能指数测量优于对照组;术后6周运动神经传导速度恢复率及肌肉复合动作电位波幅恢复率、腓肠肌湿重比细胞移植组较对照组高,差异有统计学意义(P﹤0.05);术后1-6周均可检测到带GFP标记的阳性细胞,移植的细胞部分可表达施万细胞标记物GFAP。  结论:体外培养的ADSCs源性的神经祖细胞体内移植后,可在损伤的神经区域存活、迁移并分化,促进神经纤维的修复,减少腓肠肌的萎缩。
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