【摘 要】
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目的基于毒瘀交阻的理论指导,研究不同剂量复方蜥蜴散通过HIF-1α介导的PI3K/AKT信号通路,影响胃癌上皮间质转化（EMT）而干预胃癌浸润转移的作用机制。方法将120只SPF级4周龄BALB/c-nu雄性裸鼠利用随机数字表分为6组:模型对照组（A组）、华蟾素阳性对照组（B组）、5-Fu阳性对照组（C组）、复方蜥蜴散低剂量组（0.07g/ml）（D组）、复方蜥蜴散中剂量组（0.14g/ml）（E
【基金项目】
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2018年国家自然科学基金:基于HIF-1α介导PI3K/AKT通路复方蜥蜴散从毒瘀交阻干预胃癌EMT作用机制及与胃癌浸润转移的相关性研究（项目编号:81860807）；
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目的基于毒瘀交阻的理论指导,研究不同剂量复方蜥蜴散通过HIF-1α介导的PI3K/AKT信号通路,影响胃癌上皮间质转化（EMT）而干预胃癌浸润转移的作用机制。方法将120只SPF级4周龄BALB/c-nu雄性裸鼠利用随机数字表分为6组:模型对照组（A组）、华蟾素阳性对照组（B组）、5-Fu阳性对照组（C组）、复方蜥蜴散低剂量组（0.07g/ml）（D组）、复方蜥蜴散中剂量组（0.14g/ml）（E组）、复方蜥蜴散高剂量组（0.28g/ml）（F组）,每组20只。采用人胃癌SGC-7901细胞悬液,制备人胃癌裸鼠原位移植瘤模型,连续给药6周后停药,取胃癌及肿瘤组织进行相关检测。采用TUNEL测人胃癌SGC-7901细胞凋亡,免疫组织化学法和Western-blot检测HIF-1α、PI3K、p-AKT、AKT、Integrinβ3及EMT相关蛋白E-cadherin表达。结果1.TUNEL检测细胞凋亡:与模型对照组相较而言,药物干预组人胃癌SGC-7901细胞凋亡率不同程度上增强（P<0.05）;与阳性对照组比较,复方蜥蜴散不同剂量组细胞凋亡率显著增强（P<0.05）;不同剂量复方蜥蜴散组内比较,高剂量浓度组诱导细胞凋亡率较大（P<0.05）。2.免疫组织化学法检测HIF-1α、PI3K、p-AKT、Integrinβ3及EMT相关蛋白E-cadherin表达:与模型对照组比较,在一定程度上药物干预组HIF-1α、PI3K、p-AKT、Integrinβ3蛋白表达水平降低,EMT相关蛋白E-cadherin的表达水平显著增高（P<0.05）;与阳性对照组比较,复方蜥蜴散不同剂量组HIF-1α、PI3K、p-AKT、Integrinβ3蛋白表达水平降低,EMT相关蛋白E-cadherin表达水平显著增高（P<0.05）;不同剂量复方蜥蜴散组内比较,高剂量浓度组相关蛋白表达水平较低（P<0.05）,E-cadherin表达水平显著增高（P<0.05）。3.Western-blot检测HIF-1α、PI3K、p-AKT、AKT、Integrinβ3及EMT相关蛋白E-cadherin表达:与模型对照组比较,药物干预组各组灰度值不同程度降低,E-cadherin升高（P<0.05）;与阳性对照组比较,不同剂量复方蜥蜴散各组灰度值不同程度上偏低,E-cadherin升高（P<0.05）;不同剂量复方蜥蜴散组内比较,高剂量组灰度值相对降低,E-cadherin升高（P<0.05）。结论1.复方蜥蜴散对人胃癌细胞SGC-7901移植瘤的细胞凋亡起到一定的诱导作用。2.不同剂量复方蜥蜴散在一定程度上通过下调PI3K/AKT信号通路的活性,抑制HIF-1α的表达,达到抑制裸鼠移植瘤胃癌上皮间质转化,干预胃癌浸润转移的作用。3.复方蜥蜴散比华蟾素或5-Fu抑制裸鼠移植瘤胃癌上皮间质转化的效果更好且高剂量复方蜥蜴散抑制效果更好。
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