【摘 要】
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目的:观察高糖环境下IL-10与机械刺激对人牙周膜细胞（HPDLCs）OPG、RANKL表达的影响,探究IL-10对糖尿病患者牙槽骨在正畸力作用下骨改建的影响。方法:1.采用组织块法培养HPDLCs并进行传代,用免疫组化的方法对所培养细胞进行鉴定。2.用ELISA法检测各组细胞培养上清液中OPG、RANKL的表达。根据机械刺激方式不同分为压力组和张力组。压力组分出4小组:A组:HPDLCs+低糖型
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目的:观察高糖环境下IL-10与机械刺激对人牙周膜细胞（HPDLCs）OPG、RANKL表达的影响,探究IL-10对糖尿病患者牙槽骨在正畸力作用下骨改建的影响。方法:1.采用组织块法培养HPDLCs并进行传代,用免疫组化的方法对所培养细胞进行鉴定。2.用ELISA法检测各组细胞培养上清液中OPG、RANKL的表达。根据机械刺激方式不同分为压力组和张力组。压力组分出4小组:A组:HPDLCs+低糖型DMEM+压力刺激;B组:HPDLCs+低糖型DMEM+压力刺激+IL-10干预;C组:HPDLCs+高糖型DMEM+压力刺激;D组:HPDLCs+高糖型DMEM+压力刺激+IL-10干预。张力组分出4小组:E组:HPDLCs+低糖型DMEM+张力刺激;F组:HPDLCs+低糖型DMEM+张力刺激+IL-10干预;G组:HPDLCs+高糖型DMEM+张力刺激;H组:HPDLCs+高糖型DMEM+张力刺激+IL-10干预。每小组分别对HPDLCs施加压力或张力刺激0、12、24、48、72h,B、D、F、H组同时用IL-10进行干预。结果:1.培养出细胞胞体为长梭形或多角形,围绕组织块向四周呈放射状生长。传代后细胞分布均匀,呈束状、旋涡状或放射状,生长速度快。免疫组化染色后,细胞VIM染色阳性,CK染色阴性,符合间充质来源的细胞特征,可判定所培养细胞为HPDLCs。2.压力组:4组HPDLCs受到压力刺激后,OPG、RANKL浓度变化趋势相同,OPG先上升后下降,RANKL随时间逐渐上升,OPG/RANKL比值随时间逐渐下降。A、B组,A、C组,C、D组组间两两比较,OPG、RANKL、OPG/RANKL比值差异均有统计学意义（P<0.05）。张力组:4组HPDLCs受到张力刺激后,OPG、RANKL浓度变化趋势相同,OPG随时间逐渐上升,RANKL先小幅上升后下降,OPG/RANKL比值随时间逐渐升高。E、F组,E、G组,G、H组组间两两比较,E、F组RANKL浓度变化差异无统计学意义（P>0.05）,其余组间OPG、RANKL、OPG/RANKL比值差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:1.采用组织块培养法,成功培养出HPDLCs。2.HPDLCs受到压力或张力机械刺激的情况下,高糖环境可使人牙周膜细胞OPG表达减少,RANKL表达增多,OPG/RANKL比值减小,骨吸收大于骨形成。加入IL-10干预后可拮抗高糖的作用,使人牙周膜细胞OPG表达增多,RANKL表达减少,上调OPG/RANKL比值。在牙周组织局部应用IL-10有可能改善糖尿病正畸时牙周高糖环境所致的牙槽骨吸收。
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