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近年来,荷叶作为新资源植物,正被人们广泛地研究利用。荷叶中含有大量对人体有益的活性物质,包括生物碱、黄酮类化合物、活性多糖等。本工作建立了同步分离提取、纯化此三种活性成分的工艺方法,并对荷叶提取物与DNA和BSA相互作用方式进行了初步探索。研究发现,从荷叶干粉中提取荷叶黄酮的工艺参数为:pH=13;乙醇浓度为50%;固液比为:1:30;提取温度为75℃;提取时间为2小时;提取次数为1次。从提取黄酮后的荷叶残渣中提取荷叶生物碱的工艺参数为:pH=2.0;乙醇浓度为90%;固液比为:1:25;提取温度为85℃;提取时间为2小时;提取次数为2次。从提取黄酮及生物碱后的荷叶残渣中用水提取荷叶多糖的工艺参数为:pH=7;固液比为:1:30;提取温度为75℃;提取时间为2小时;提取次数为1次。经AB-8大孔树脂纯化荷叶黄酮后,得到棕黄色粉末,纯度为84.43%,得率为90%。经D101大孔树脂纯化荷叶生物碱后,得到黄绿色粉末,纯度为82.76%,得率为90.21%。经脱蛋白和脱色处理荷叶多糖后,得到略带黄色的白色粉末,纯度为85.74%,得率为85.81%。此研究为对充分利用我国的天然植物资源——荷叶、并作为保健食品的开发利用提供了科学数据,具有重要的应用价值。建立了在中性色谱条件下采用反相高效液相色谱准确测定荷叶生物碱组成成分的方法,并结合质谱分析,测定了荷叶生物碱提取物中五种主要的生物碱成分的分子量,分别为M_A265,M_B311,M_C281,M_D295,M_E311,推测依次为番荔枝碱(Anonaine),原荷叶碱(Pronuciferine),N-去甲基荷叶碱(N-Nornuciferine),荷叶碱(nuciferine)和亚美罂粟碱(Armepavine)。在选定的两相溶剂体系下,采用HSCCC法,研究得到分离纯化最优工艺条件:温度31℃,螺旋管转速850rpm,流速1.8mL/min。成功地对荷叶生物碱进行了分离纯化,得到的五个组分,经HPLC检测,纯度分别为:番荔枝碱99.6%;原荷叶碱)91.2%;N-去甲基荷叶碱98.5%;荷叶碱99.3%;亚美罂粟碱96.1%。探索了荷叶生物碱提取物及荷叶碱与DNA及BSA的作用方式,研究结果表明,在生理条件下(pH=7.4),DNA对荷叶碱及荷叶生物碱提取物的荧光猝灭属于形成了新的复合物的静态荧光猝灭,荷叶碱及荷叶生物碱提取物与DNA作用方式均为混合方式,即嵌插与沟槽作用是两种主要作用方式,测得其结合常数分别为1.396×10~6L/mol,3.765×10~6L/mol。在生理条件下(pH=7.4),两种供试物都能与BSA形成复合物,从而引起了对BSA荧光的静态猝灭。测得其结合常数分别为5.194×10~4L/g,1.127×10~5 L/g。为深入研究生物碱类化合物的药物开发和新药筛选提供了一定的理论依据。