以中华蜜蜂的工蜂成体为提酶材料，经正丁醇提取、硫酸铵分级沉淀，0.15％NaCl溶液透析，得粗酶液。用Sephadex G-150葡聚糖层析柱纯化粗酶，获得提纯的碱性磷酸酶，提纯倍数为16.79，比活力达到135.85 U/mg。 以对硝基苯磷酸二钠（PNPP）为底物，测定提纯后的碱性磷酸酶的理化性质。结果表明：该酶的最适温度为45℃，最适pH值为8.6，米氏常数（Km值）为0.97×10^-3mol／L。 HPO₄^2-是中华蜜蜂工蜂碱性磷酸酶催化pNPP水解的产物之一，WO₄^2-、MoO₄^2-是产物类似物，它们对酶均起了较强的抑制作用，并且抑制类型均是竞争性抑制。Na⁺、K⁺和Li⁺等正一价金属离子对酶活力无影响。Mg²⁺、Ca²⁺、Ba²⁺、Ni²⁺、Mn²⁺、Co²⁺、Zn²⁺对酶均为激活作用，Cu²⁺、Hg²⁺、Cd²⁺及Ag⁺为抑制作用，并且Cu²⁺对酶的抑制类型为非竞争抑制类型。甲醛、甲醇、乙醇和乙二醇对碱性磷酸酶均有抑制作用。脲对AKP的变性失活作用，按脲浓度可分为低于3mol／L和高于3mol／L两种类型。 在一定条件下，分别采用二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）、N—溴代琥珀酰亚胺（NBS）、苯甲基磺酰氟（PMSF）、溴乙酸（BrAc）、乙酰丙酮、巯基乙醇（ME）等化学修饰剂选择修饰中华蜜蜂碱性磷酸酶多种氨基酸残基，并测定其酶活力变化。结果表明，DTNB、PMSF的修饰不表现对酶的抑制作用，而NBS、BrAc、ME能显著抑制酶的活力，乙酰丙酮也能抑制酶的活力，但是不太明显。因此认为Trp、His是中华蜜蜂工蜂碱性磷酸酶的必需功能基团，部分二硫键对保护酶的催化功能也是必需的。