脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄芩苷等诱导细胞凋亡及其凋亡相关因子的初步研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:joyce
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是由镰刀菌属病原真菌产生的真菌毒素之一,在自然界广泛存在,可引起人畜中毒。本实验采用不同浓度的DON作用于PIEC、HUVEC和Lovo三种细胞24h,倒置显微镜下观察其形态变化,MTT法测定细胞增殖的变化,TUNEL法检测DON诱导这三种细胞凋亡的凋亡率,用免疫组织化学染色方法测定DON诱导这三种细胞凋亡过程中caspase-9和Bax表达的变化,结果显示,高浓度DON可明显改变细胞的形态,不同浓度的DON均可抑制细胞的增殖,相同浓度下对PIEC的抑制作用最显著(统计学比较P<0.05)。用TUNEL检测凋亡率,结果显示不同浓度的DON对这三种细胞均有诱导凋亡的作用,对于PIEC和Lovo而言,在DON浓度为500 ng/ml时,凋亡率达到最高(71.74%),HUVEC则在DON浓度为5μg/ml时,凋亡率达到最高(26.61%),此后随浓度的升高,凋亡率下降,可能与凋亡细胞崩解脱离细胞片有关。同时,根据试验结果,初步推断,DON诱导PIEC凋亡可能与Caspases途径有关,凋亡促进基因Bax在其中起到了一定的凋亡促进作用,而在诱导HUVEC和Lovo细胞凋亡的过程中未检测到Caspase-9和Bax的变化,故认为DON诱导这两种细胞凋亡与Caspases途径无关,与促凋亡因子Bax无关。 本试验还对两种中药单体成分——黄芩苷和脱水穿心莲内酯,及阿司匹林诱导BGC-823、HCT-8和Lovo三种胃肠道癌细胞凋亡及在凋亡过程中Caspase-9和Bax的表达的变化进行了初步研究,结果显示,三种药物均可诱导这三种细胞的凋亡,其中,黄芩苷诱导Lovo细胞的凋亡率最高,BGC-823次之;脱水穿心莲内酯诱导HCT-8细胞的凋亡率最高,BGC-823次之;阿司匹林诱导BGC-823和HCT-8的凋亡率高于其诱导Lovo细胞的凋亡率,试验中还发现,黄芩苷和阿司匹林诱导Lovo细胞凋亡,凋亡率在96h时达到最高,而到一周时凋亡率下降。本试验通过免疫组化方法检测三种药物诱导细胞凋亡过程中Caspase-9和Bax的变化。结果显示,诱导凋亡过程中Caspase-9的表达均有升高,推测这三种药物诱导BGC-823、HCT-8和Lovo三种细胞凋亡与Caspases途径有关。而凋亡抑制基因Bax在脱水穿心莲内酯诱导Lovo细胞凋亡中表达未检测到变化,推测该细胞凋亡过程与Bax无关。除此以外,Bax在黄芩苷、脱水穿心莲内酯和阿司匹林诱导BGC-823、HCT-8和Lovo细胞中的表达均有升高,Bax在凋亡过程中可能起到凋亡促进作用。另外,本试验还用PCR-变性PAGE方法检测了错配修复基因两个位点:Bat25和D2S123两个位点的微卫星变化,结果显示
其他文献
学生要真正形成一种美术能力,课外的练习就必不可少,校园美术活动的开展为学生美术能力的提高,提供了很好的平台,本文主要从三个方面进行阐述,让大家对美术活动的开展的意义
高中阶段的生物课程容量非常大,除了基本的动植物学知识,课本中涉及了大量的医学健康知识,在学习的过程中我们不仅要记忆相关的知识点,更需要从营养和健康的角度出发,将生物
英语专业视听说课程,目的在于提高学生的听力理解、语言表达能力以及综合运用英语进行交际的能力.外语视听说教学离不开对媒体信息的播放和对录音脚本展现形式的控制,这些技
随着新课程改革的不断深入,以及互联网技术的普及,微课逐渐成为我国课堂教学的一种重要形式.微课以其短小精悍和针对性强的特点,在高中信息技术课程中也受到师生的广泛青睐.
在高中英语学习阶段,老师常常教导我们,词汇学习是基础,而语法学习,是正确应用英语词汇进行交际的必要内容.基于此,本文就高中英语语法的学习,阐述几点学习心得与体会,包括正