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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是由镰刀菌属病原真菌产生的真菌毒素之一,在自然界广泛存在,可引起人畜中毒。本实验采用不同浓度的DON作用于PIEC、HUVEC和Lovo三种细胞24h,倒置显微镜下观察其形态变化,MTT法测定细胞增殖的变化,TUNEL法检测DON诱导这三种细胞凋亡的凋亡率,用免疫组织化学染色方法测定DON诱导这三种细胞凋亡过程中caspase-9和Bax表达的变化,结果显示,高浓度DON可明显改变细胞的形态,不同浓度的DON均可抑制细胞的增殖,相同浓度下对PIEC的抑制作用最显著(统计学比较P<0.05)。用TUNEL检测凋亡率,结果显示不同浓度的DON对这三种细胞均有诱导凋亡的作用,对于PIEC和Lovo而言,在DON浓度为500 ng/ml时,凋亡率达到最高(71.74%),HUVEC则在DON浓度为5μg/ml时,凋亡率达到最高(26.61%),此后随浓度的升高,凋亡率下降,可能与凋亡细胞崩解脱离细胞片有关。同时,根据试验结果,初步推断,DON诱导PIEC凋亡可能与Caspases途径有关,凋亡促进基因Bax在其中起到了一定的凋亡促进作用,而在诱导HUVEC和Lovo细胞凋亡的过程中未检测到Caspase-9和Bax的变化,故认为DON诱导这两种细胞凋亡与Caspases途径无关,与促凋亡因子Bax无关。 本试验还对两种中药单体成分——黄芩苷和脱水穿心莲内酯,及阿司匹林诱导BGC-823、HCT-8和Lovo三种胃肠道癌细胞凋亡及在凋亡过程中Caspase-9和Bax的表达的变化进行了初步研究,结果显示,三种药物均可诱导这三种细胞的凋亡,其中,黄芩苷诱导Lovo细胞的凋亡率最高,BGC-823次之;脱水穿心莲内酯诱导HCT-8细胞的凋亡率最高,BGC-823次之;阿司匹林诱导BGC-823和HCT-8的凋亡率高于其诱导Lovo细胞的凋亡率,试验中还发现,黄芩苷和阿司匹林诱导Lovo细胞凋亡,凋亡率在96h时达到最高,而到一周时凋亡率下降。本试验通过免疫组化方法检测三种药物诱导细胞凋亡过程中Caspase-9和Bax的变化。结果显示,诱导凋亡过程中Caspase-9的表达均有升高,推测这三种药物诱导BGC-823、HCT-8和Lovo三种细胞凋亡与Caspases途径有关。而凋亡抑制基因Bax在脱水穿心莲内酯诱导Lovo细胞凋亡中表达未检测到变化,推测该细胞凋亡过程与Bax无关。除此以外,Bax在黄芩苷、脱水穿心莲内酯和阿司匹林诱导BGC-823、HCT-8和Lovo细胞中的表达均有升高,Bax在凋亡过程中可能起到凋亡促进作用。另外,本试验还用PCR-变性PAGE方法检测了错配修复基因两个位点:Bat25和D2S123两个位点的微卫星变化,结果显示