拟南芥FHY3不同结构域在调节光敏色素A信号传导中的功能研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:GISSeven
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
高等植物在不断地进化过程中形成了一个光感受器的网络,从而可以感知光环境的变化,不断适应环境,促进自身的生长发育。在这些光感受器中,光敏色素(phy)是迄今为止研究最为清楚的一类光感受器,它以两种不同的形式存在,即红光吸收型(Pr)和远红光吸收型(Pfr)。在拟南芥(Arabidopsis thaliana)中,存在五种光敏色素编码基因(PHY),即PHYA-PHYE。phyA是高等植物中调控远红光诱导反应的主要光接受体。随着分子生物学、遗传学等研究技术的不断发展,对模式植物拟南芥的大量研究,建立了phyA信号传导的框架。在黑暗中phyA以非活性的Pr形式位于细胞质中,用适当波长的光照射后,就转化成活性状态的Pfr转移到细胞核内调控基因的表达。FAR-RED ELONGATED HYPOCOTYLS 3(FHY3)和FAR-RED-IMPAIREDRESPONSE 1(FAR1)是phyA信号途径中的调控因子,能够直接结合到FAR-REDELONGATED HYPOCOTYL 1(FHY1)和FHY1-like(FHL)的启动子上,激活它们的表达,而FHY1和FHL的蛋白产物,在phyA的进核途径中起着重要的作用。FHY3和FAR1与Mutator类转座酶具有大量的序列相似性,并且拥有相似的结构域,包括氮末端的C2H2型锌指结构域、核心转座酶结构域以及碳末端的SWIM模体。为进一步明确FHY3和FAR1在phyA信号传导途径中的作用,本论文对FHY3和FAR1之间部分重叠功能的分子机理以及FHY3不同结构域的具体功能进行探讨,取得如下结果:1.采用FHY3和FAR1启动子转换的手段,构建出FHY3p::FHY3/fhy3-4、FAR1p::FAR1/far1-2、FAR1p::FHY3/far1-2、FAR1p::FHY3/fhy3-4、FHY3p::FAR1/far1-2和FHY3p::FAR1/fhy3-4转基因植株,通过对表型特征的分析,研究发现这对同源基因的启动子活性和蛋白功能的差异性是两者之间具有部分重叠功能所必须的。2.采用点突变的手段研究阐明了FHY3不同结构域在phyA信号传导途径中发挥着十分重要的作用,具体如下:(1)通过酵母单杂交和电泳迁移率检测(EMSA)实验,并结合转基因植株的表型、生理特征以及FHY1/FHL表达水平的分析,证实了氮末端C2H2型锌指结构域对于FHY3在植物中发挥DNA结合功能有着至关重要的作用。(2)通过酵母单杂交和拟南芥原生质体转化实验,并结合转基因植株的表型、生理特征以及FHY1/FHL表达水平的分析,证实了核心转座酶结构域和碳末端的SWIM模体对于FHY3在植物体内发挥转录激活活性和生物学功能至关重要。(3)通过酵母双单杂交实验研究阐明了FHY3的核心转座酶结构域和碳末端的SWIM模体在蛋白质相互作用中必不可少,包括自身同源二聚体以及与FAR1异源二聚体的形成,而且FHY3二聚体的形成能力与其在细胞中的转录调控活性密切相关。(4)通过共聚焦显微镜(Confocal)检测转基因植株中黄色荧光蛋白(YFP)信号,进一步明确了FHY3和FAR1蛋白质定位于植物细胞核,而且发现保守氨基酸替换并不影响FHY3蛋白的核定位。
其他文献
随着网络技术的飞速发展,以太网成为应用范围最广的局域网通信协议标准。但其非同步的工作方式,使得数据传输时间难以精确。为了增加以太网数据传输的实时性与可靠性,TSN时间敏感网络应运而生。TSN采用确定性调度机制对事件进行响应,这与高精度时钟同步系统的支持密不可分。IEEE 802.1AS协议是TSN协议簇中的高精度时钟同步协议标准,它提供了时间敏感网络中的精准定时与同步技术,以确保网络中的所有节点都
美与善的关系问题是中国传统美学和伦理学的核心问题,对这两个范畴的深入剖析,将十分有利于进一步认识中国古典美学的本质.以字源学为基础,从"美"、"善"的造字结构及先秦文献
阿尔茨海默病(AD)是以认知、记忆力衰退为主要表现的中枢神经系统退行性疾病,其主要病理特征为胞外β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积所形成的老年斑,胞内异常磷酸化的Tau蛋白聚集形成
以刺玫果、南瓜为主要原料,通过单因素试验和正交试验研究复合饮料的最佳生产工艺条件。试验结果表明复合饮料的最佳配方为:刺玫果汁20%、南瓜浆汁16%、白砂糖8%、柠檬酸0.15
刚地弓形虫(Toxoplasmosis gondii)是一种寄生于多种动物体内的单细胞原虫,它有包括:鸟类、哺乳动物以及人类等非常广泛的中间宿主。值得注意的是,带有弓形虫卵囊的食物和水源是人们感染弓形虫的重要途径,而雌性动物则是死亡数较多的群体。衣原体(Chlamydia spp.)是革兰氏阴性菌,寄生在细胞内,种类繁多,其中主要的人畜共患衣原体为鹦鹉热衣原体,患该病的动物会导致肺炎、结膜炎、脑炎
党的三代领导人在中国革命、建设和改革的实践中,丰富和发展了马克思主义实践观,他们都继承、坚持并发展、超越了前代人的实践观,形成了各具特色的思想,是当代中国真正的实践哲学
本文研究了基于嵌入式Linux的Web Server的构建,并及将其应用在多媒体中央控制台的设计。实现了多媒体设备的远程监控。 本文包括以下要点: 分析以ARM7(Advanced RISC
本文采用实地调研、调查问卷、访谈等方法研究武汉市街道口区域建筑立面的现状及存在的不足之处,实地调研街道口建筑立面现状及存在的实际问题,分析现状存在及潜在的原因,及
"人工智能+教育"自身的发展史,从某种程度上代表了一些敢于创新的教育者的魄力和胆识,更为当前更多的教育者投身到教育改革中提供了榜样。但也需要认识到这些开创者的魄力不
客户是银行的唯一利润中心,客户资源的竞争也就影响着整个银行业的竞争,商业银行早已将客户关系管理纳入发展战略贯穿于经营运作的每个环节中。但对于中国农业发展银行(以下简称农发行)来说,虽然管理行早就提出要加强客户关系管理,但更多的还是停留在文件制度和会议讲话上,使其在一线支行的日常业务中得不到重视。因此如何结合农发行历史问题和实际情况,留住优质客户、发展潜在客户,建立具有农发行特色的客户关系管理策略值