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酶解或微生物发酵大豆、豆粕或大豆蛋白可以得到大豆肽。大豆肽通常由2~9个氨基酸组成，其中必需氨基酸平衡良好、含量丰富。大豆肽独特的理化特性和生理功能使大豆肽可被广泛应用于食品、日用品、医药保健品等相关行业中。我国于20世纪80年代开始大豆肽的研究，并在基础理论研究方面取得许多成果，但是生产成本高、水解度不高是制约大豆肽产业化的主要因素。 本文以脱脂豆粕为原料，以水解度和可溶性氮指数为指标，选用碱性蛋白酶和风味蛋白酶为水解酶，以酶解pH值、酶解温度、碱性蛋白酶（风味蛋白酶）酶与底物浓度比以及底物浓度设计单因素实验，分别研究各因素对两种酶水解豆粕的影响，得出碱性蛋白酶水解豆粕的最佳条件为：pH为8.5，温度为55℃，酶与底物浓度比2％，底物浓度为8%；风味蛋白酶水解豆粕的最佳条件为：pH为7.0，温度为50℃，酶与底物浓度比为3%，底物浓度为8%。根据单因素实验结果，设计4因素3水平的响应曲面实验来优化碱性蛋白酶和风味蛋白酶双酶酶解豆粕的条件。通过Design-Expert软件分析得出最佳条件：pH8.0，温度56.03℃，碱性蛋白酶与底物比3%，风味蛋白酶与底物比3.56%，底物浓度8%，此时水解度为44.17%，可溶性氮指数为85.89%。在最佳酶解条件的前提下，以水解过程中水解度进程为依据确定最佳水解时间为6h。 选用DA201-CⅡ型大孔树脂进行洗脱，条件为：填料的径高比为1:35，水解液和树脂体积比为1:1，大豆肽溶液的pH值为2.0，上样流速1ml/min、上样量40ml、洗脱流速2.0ml/min,最佳洗脱液为75%的乙醇。经75%乙醇洗脱后，脱盐率为82.69%，脱色率为62.34%，肽损失率为8.34%。取经大孔树脂脱色脱盐的浓缩肽粉溶解于少量的超纯水，适量加到Sephadex G-15柱上（1.6cm×50cm），在室温下用超纯水进行洗脱，洗脱流速为1.0ml/min，检测波长为220nm，共得到4个组分a、b、c、d，其中a峰为柱前峰，通过分子量标准物洗脱体积与分子量对数做出的标准曲线，得到其余组分的分子量为：1350.8、428、110Da，分离效果良好。本试验为大豆肽的工业化生产、粗分离提供了一定的理论依据。