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动植物油脂均以甘油三脂的形式广泛存在于动植物体内和自然环境中,同时也是环境水体油污染的重要组分。当今社会,由于餐厨垃圾等生活垃圾排放量的逐年递增,餐饮废弃油脂的降解处理和相应的环境问题的治理越来越受到重视。在一些生物体内,甘油三酯经过酯酶降解后,可以通过乙醛酸途径转化为琥珀酸,从而进入其他生物大分子的生成代谢途径。因此,获得乙醛酸循环关键酶基因就成为构建油脂单一碳源高效降解菌株的关键。本研究从山西屠宰场污水排放处的污泥中,富集筛选得到一株具有油脂降解能力的菌株,其生理生化鉴定和16SrRNA基因序列同源性分析表明,实验菌株为一株革兰氏阴性菌,属于无色杆菌属(Achromobacter sp.)。通过使用紫外分光光度仪和液相色谱仪测定菌株的降解特性,结果表明:(1)实验菌株在72h左右对橄榄油的降解率可以达到85%。(2)菌株降解油脂的最适pH条件为7.5,最适温度条件为35℃。(3)菌株可以在pH值低于9的碱性环境中保持较高降解率,同时对低于40g/L的盐浓度具有耐受性。通过同源克隆得到了关键酶异柠檬酸裂解酶和苹果酸合酶基因序列,生物信息学分析结果表明:(1)异柠檬酸裂解酶和苹果酸合酶基因序列开放阅读框分别816bp、492bp,分别编码272、164个氨基酸残基。(2)异柠檬酸裂解酶预测模型含有丰富的α螺旋结构,序列不含有信号肽与二硫键,含有一处蛋白结合位点,三级结构为同源四聚体,不包含配基。(3)苹果酸合酶预测模型含有9个α螺旋与3个β折叠结构,序列不含有信号肽与二硫键,含有4处蛋白结合位点,三级结构为单体,不含配基。研究分别构建了关键基因的组成型表达载体,通过电转导入中华根瘤菌NP1中,重组菌60h左右对油脂的降解率可以达到75%。本研究分离得到油脂降解菌株,丰富了油脂降解菌的微生物资源;降解关键酶基因的克隆及酶学性质研究,为油脂降解利用、水体污染的综合治提供了理论基础和技术支持。