根结线虫(Meloidogyne spp.)是一类寄生于作物根部,严重危害作物的病原物。近年来,由于农业结构的调整,温室大棚的推广面积越来越大,以前在陕西省极少报道的根结线虫病,现在也在各地温室大棚里广泛发生。因此,本研究首次对发生于陕西省主要蔬菜基地大棚中的根结线虫病原采用形态学与mtDNA-PCR-RFLP分子标记相结合的方法进行了鉴定。为今后的防治、正确选择抗病品种和育种打下基础。通过形态学和mtDNA-PCR-RFLP分子标记鉴定,明确了西安(阎良北屯村)、咸阳(渭滨区李家村)、渭南(临渭区阳尹村)、宝鸡(扶风南台村)及杨凌(西魏店、殿背湾)及武功锣鼓村Mi等7个群体为南方根结线虫(Meloidogyne incognita)。兴平农场群体为爪哇根结线虫(M. javanica)。武功锣鼓村Ma群体为花生根结线虫(M. arenaria)。武功锣鼓村群体为南方与花生根根结线虫的混合侵染群体。形态学鉴定过程中发现,根结线虫的雌虫会阴花纹是区分种类最有效的鉴别特征。其他特征如雌、雄虫及二龄幼虫的口针基部球到背食道腺口的距离(DGO)、口针长度、口针形态、体长、最大体宽及二龄幼虫尾部形态等特征在区分不同种时所起的作用是有限的,只能作为分种的辅助标准。mtDNA-PCR-RFLP分子标记技术在进行根结线虫的鉴定时具有灵敏、快速、准确的优点,特别是需要进行大量样品鉴定时,一次就可完成。本研究对根结线虫群体线粒体DNA的COⅡ和lrRNA基因间序列进行扩增。结果表明:1个群体的扩增片段大小约为1.1kb,为花生根结线虫的特异性条带;其余8个群体的扩增片段大小均为1.7kb。进一步对PCR扩增产物RFLP分析,结果表明:9个根结线虫群体中,扩增片段为1.7kb的8个群体中有7个可以被HinfⅠ酶切,产生约1.3kb和0.4kb的两个限制性片段,确定为南方根结线虫;另外一个不能被HinfⅠ酶切,可以确定为爪哇根结线虫。而花生根结线虫的扩增片段也不能被HinfⅠ酶切,进一步确定其花生根结线虫。