拟南芥植酸酶基因AtMINPP的功能研究

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磷酸肌醇磷酯酶(MINPP)是目前已知的能特异水解植酸的一类植酸酶,普遍存在于细菌、植物及动物中。在植物中,MINPP参与了逆境胁迫、激素响应、信号传导等多个过程。为了深入研究MINPP在植物中的生理功能,利用生物信息学分析表明拟南芥中存在一个同源基因AtMINPP.通过AtMINPP缺失突变体atminpp分析发现AtMINPP在生长发育和信号响应等方面具有重要的调控作用。本文对AtMINPP功能进行了初步研究,获得了以下结果:1,AtMINPP有11个外显子组成,编码487个氨基酸,含有组氨酸酸性磷酸酶(HAP)特有的保守序列RHGXRXP和HAE活性位点基序,同时基因芯片表达谱分析表明AtMINPP基因受多种激素和环境胁迫信号的调控。本文同时构建了AtMINPP原核表达载体并分析了其在Transetta (DE3)宿主菌中目的蛋白可溶性表达水平最高。2,通过对野生型和突变体atminpp根系生长的表型分析,发现突变体主根较短,进一步在突变体atminpp中超表达AtMINPP能使突变体恢复到与野生型相近的表型,表明突变体的表型是由该基因缺失引起的。同时对AtMINPP启动子区域驱动的GUS报告基因进行表达分析,发现AtMINPP在萌发初期根中特异表达,表明AtMINPP参与了根系的生长发育调控。3,突变体atminpp在土培2周后莲座叶产生了明显卷曲、缩小,而且抽苔后的突变体较矮小、瘦弱。突变体atminpp回复表达该基因后能恢复至野生型莲座叶平展、株型较高且壮的表型,表明AtMINPP参与了植物地上部的生长发育调控。4,进一步研究发现突变体atminpp表现出对IAA较野生型不敏感,10 nM-100nMIAA可以明显抑制野生型拟南芥主根的伸长,而对突变体atminpp的抑制并不明显。表明AtMINPP介导了植物对生长素信号的响应,其突变体atminpp产生的表型可能与IAA信号响应调控的改变有关。
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