自1983年，Warren和Marshall从胃粘膜活检标本中成功地分离和培养出幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)以来，国内外学者对其进行了深入的研究，现一致认为：Hp是慢性活动性胃炎的病原菌，活动性溃疡的重要致病因子，是胃MALT淋巴瘤的重要致病因子，也可能是胃癌的协同致病因子，因此1994年WHO将其列入一类致癌因子。根据Correa勾画的肠型胃癌自然史，Hp相关性胃炎的大量出现，无疑会增加慢性萎缩性胃炎(CAG)，肠上皮化生及异型增生的发生率，由Hp感染→慢性胃炎→胃粘膜萎缩→肠化→异型增生→胃癌的发展模式已为国内外多数学者所赞同。根据Hp是否同时表达空泡毒素基因(vacuolating toxin gene，vacA)和细胞毒相关基因(cytotoxin associated gene A，cagA)，可将Hp分为两型：Ⅰ型，即高毒力株Hp，具有cagA基因，表达CagA蛋白和VacA蛋白；Ⅱ型，即低毒力株Hp，不具有cagA，不产生CagA蛋白和VacA蛋白。我国属Hp高感染国家，普通人群中的感染率在50％-80％之间，但大多无症状或不发病，只有少数人可表现出不同程度的症状。因此，Hp菌株间毒力的不同及胃粘膜防御功能的强弱，是Hp感染者是否发病或发生何种疾病的重要原因。Hp感染的西药治疗已取得了80-90％左右的根除率，但其副作用发生率高(5％-20％)，依从性差，复发率达10％，长期联合应用抗生素易引起肠道菌群紊乱，其安全性值得重视，而且由于治疗Hp感染方案的广泛使用，Hp的耐药趋势不断增长，有报道：对甲硝唑耐药的Hp菌株已高达50％。十余年来，国内学者对中医药治疗Hp感染的研究取得了可喜的成果，但这些研究大多停留在临床观察阶段，对其治疗机理也缺乏全面的认识。过去在体外抑菌试验方面虽已做了不少工作，但因其本身固有的缺陷，并不能从本质上来解释中医药真正的疗效机理，而且研究多注重在Hp转阴或根除方面，但在Hp本身受药物的影响方面，以及利用中药来干预Hp毒力所致胃粘膜上皮细胞的转变，使之发生变化的研究则很少，甚至缺如。中医认为“正气存内，邪不可干”，“邪之所凑，其气必虚”；从微观角度而言，Hp当属中医“邪气”范畴，且多具“毒”的性质，这是多年来中医在该领域研究中所达成的共识，也是组方配伍清热解毒药的理论依据，江苏省中医院徐景藩先生经过多年的研究认为，脾胃气虚是Hp感染的病理基础，胃中热郁则是其病理产物，为Hp的附着、繁殖和致病提供了客观条件，益气清热是治疗Hp感染的主要原则，通过扶正祛邪的治疗，不仅对Hp有直接杀菌和抑菌作用，而且还能通过调整机体全身和胃粘膜局部的屏障功能，来辅助抑杀并改变Hp寄居的微环境，使之不利Hp定居或繁殖，如此既能增强机体的保护因子，又能抑杀Hp以削弱其攻击因子，两者相辅相成，达到治疗Hp感染的目的。目前临床运用益气清热方治疗Hp感染的根除率虽然仅为30-35％，远较西药低，然而90％以上的患者临床症状及组织病理学检查均有显著改善，某些患者还得以康复。进一步的研究显示，益气清热方除对Hp有一定的根除作用外，治疗后Hp cagA+者明显减少，且PCNA、表达的积分值及AgNOR颗粒数均比治疗前显著下降，与对照组差异有显著性(p＜0.05)，提示中医药治疗Hp感染的机制不能局限于对Hp的直接抑杀作用，其减轻和削弱Hp毒力、降低其对胃粘膜上皮细胞的损伤作用、改善胃粘膜上皮细胞调亡与增殖的紊乱，可能也是中医“扶正祛邪”的一个方面。为了阐明中药复方治疗HP感染的机理、拆方对复方的贡献价值、丰富中医“扶正祛邪”的理论基础，我们从整体及细胞分子水平开展了下面的研究：1．药物对高毒力株HP感染裸鼠的治疗作用1．1药物对高毒力株HP感染裸鼠体重的影响中药复方组与益气组可明显减少HP感染后体重的下降，与模型组比较具有显著性差异，提示：中药复方和黄芪对HP所致感染中有预防体重下降的作用。1．2药物对高毒力株HP感染裸鼠胃系数的影响益气组可明显使HP感染鼠的胃系数降低，与模型组比较有显著差异，提示：黄芪对HP感染裸鼠胃有减轻炎性渗出等作用。1．3药物对高毒力株HP感染裸鼠HP感染率及胃粘膜病理的影响模型组HP感染率及病理改变均比较严重；复方组HP感染率降至正常组水平以下，与模型组、益气组、清热组相比，有较显著差异，并伴有病理改变减轻。益气组、清热组各项指标与模型组相比也有明显下降。2．药物对高毒力株HP致人正常胃粘膜细胞病变的干预作用2．1益气清热方及其拆方含药血清对高毒力株HP致人胃粘膜细胞GES-1凋亡的干预作用-流式细胞仪模型组的凋亡率上升，与正常组相比，具有显著性差异；复方组凋亡率显著下降，益气组与清热组也明显下降。提示：HP可使GES-1凋亡增加，而中药可使增加的凋亡率下降，保护细胞状态的稳定。2．2益气清热方及其拆方含药血清对高毒力株HP致人胃粘膜细胞GES-1凋亡的干预作用-hoechst 33258染色模型组核固缩明显；复方组能明显改善细胞凋亡现象；清热组效果较差。2．3益气清热方及其拆方含药血清对高毒力株HP致人胃粘膜细胞GES-1细胞周期改变的干预作用-流式细胞仪模型组G0-G1期细胞略有下降，S期细胞显著增加；与模型组相比，复方组S期细胞显著下降。提示：模型组细胞增殖性增加，中药复方能维持细胞的稳定。2．4益气清热方及其拆方汉含药血清对高毒力株HP致人胃粘膜细胞GES-1中cox-2蛋白表达的干预作用当把高毒力株HP与GES-1共培养后，cox-2蛋白表达显著上升，换用复方组含药血清培养液，cox-2蛋白表达下降；清热组cox-2蛋白表达积分光密度也显著下降，但总体效果稍差于益气组。2．5益气清热方及其拆方含药血清对高毒力株HP致人胃粘膜细胞GES-1中p53蛋白表达的干预作用高毒力株HP与GES-1共培养后，模型组棕色颗粒增多，颜色加深，其面密度与积分光密度增高，提示p53蛋白表达增多；复方组p53蛋白表达下降，与模型组相比，具有极显著性差异(P＜0.01)，益气组与清热组p53蛋白表达也下降，作用程度相似，但与复方组相比，还有一定差距。2．6益气清热方及其拆方含药血清对高毒力株HP致人胃粘膜细胞GES-1中bcl-2蛋白表达的干预作用高毒力株HP与GES-1共培养后，模型组bcl-2蛋白表达显著高于正常对照组；与模型组相比，复方组bcl-2蛋白表达显著下降，拆方组面密度与积分光密度略有下降，但降幅不明显。2．7益气清热方及其拆方含药血清对高毒力株HP致人胃粘膜细胞GES-1中ki67蛋白表达的干预作用高毒力株HP与GES-1共培养后，模型组ki67的面密度与积分光密度显著上升，提示ki67蛋白表达显著增加，当换用复方组合药血清培养液，ki67蛋白表达，与模型组相比，有显著性差异。拆方组液显著下降，益气组略强于清热组。2．8益气清热方及其拆方含药血清对高毒力株HP致人胃粘膜细胞GES-1中PCNA蛋白表达的干预作用高毒力株HP与GES-1共培养后，镜下观察，模型组棕色区的面密度与积分光密度显著上升，提示PCNA蛋白表达增加。复方组PCNA蛋白表达显著下降，清热组面密度也显著下降，益气组PCNA蛋白表达程度略低于清热组。