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丙氨酸消旋酶(alanine racemase, Air)(EC5.1.1.1)是以磷酸吡哆醛(pyridoxal5’-pgosphate,PLP)为辅酶,催化L型丙氨酸向D型丙氨酸转化的酶,而D型丙氨酸参与细菌细胞壁的合成,是细菌生长所必须的关键成分。丙氨酸消旋酶只广泛分布在原核生物,而不存在高等真核生物。因而成为研究和开发新型抗菌药物的靶标。中药因其资源广‘,毒副作用小,不产生耐药性等优点成为药物筛选的重要资源。以丙氨酸消旋酶为靶标,从中药中筛选丙氨酸消旋酶抑制剂,能够寻找无毒、低成本的抗菌药物同时利于阐明中药抗菌机制。本文以来源于假单胞杆菌YZ26的重组丙氨酸消旋酶His-Alr为靶标,首先采用旋光仪测定中药材浸出物对A1r活性的影响,其次用试管倍比稀释法进一步测定中药材浸出物对假单胞杆菌YZ-26生长状况的影响,对89种具有抗菌消炎作用的中药材进行筛选。结果表明,89种中药中有25种能够不同程度抑制A1r的活性,除白茅根和陈皮提取物对假单胞杆菌YZ-26生长没有抑制作用外,其余23种中药提取物均能够抑制YZ-26的生长。以牡丹皮的抑制作用最强为68.3%虎杖次之为54.55%。在培养基中加入D-ala后除牡丹皮、毛冬青、木香外剩余20种中药浸提物的抑制作用均有所缓解,其中虎杖的缓解作用最为明显,约为30%。进一步根据虎杖中各组分溶解性的不同,对其进行系统分离,得到95%乙醇提取物、石汕醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、醇溶组分和醇沉组分；利用旋光法测定各组分对Alr活性的影响,结果显示,95%乙醇提取物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物及醇沉组分对Alr均有抑制作用,其中醇沉组分作用最强,抑制率为49.51%.。醇沉组分主要含有多糖和蛋白质,用Sevag法除去蛋白质后,发现随着多糖浓度的增大,其对Alr的抑制作用也在不断的增强。因此,虎杖中抑制Air活性的物质为多糖。通过微波辐照氧化降解法将该多糖降解成小分子多糖，并用旋光法测定其对内氨酸消旋酶Alr活性的影响,揭示降解后的虎杖小分子多糖对内氨酸消旋酶Air的活性抑制作用消失。用荧光光谱分析法测定该多糖地丙氮酸消旋酶Alr的抑制活性,显示其半抑制浓度IC50为2.425mg·ml-1。试竹倍比稀释法测得该多糖对假单胞杆菌YZ-26生长的半抑制浓度MIC50为0.4925mg·ml-1。将重组内氨酸消旋酶的蛋白偶联到CNBr活化的Spharose4B柱材料上,然后与虎杖提取物的混合样品孵育,用旋光仪测定偶联在Spharose4B柱材料上的丙氨酸消旋酶的活性。结果表明结合到丙氨酸消旋酶上的虎杖提取物能够抑制其活性,抑制率为40%。用菲林试剂、碘化铋钾试剂KOH溶液及FeCl3溶液等对结合到丙氨酸消旋酶上的虎杖提取物进行鉴定,结果也显示该物质为多糖。采用硫酸-咔唑法测得该多糖中含有糖醛酸,茚三酮反应结果表明,该多糖中含有游离的-NH2。紫外图谱分析显示该多糖在300nnm处有特征吸收峰。红外图谱分析显示该多糖的官能团主要包括a糖苷键、C-O-C、-OH、C=CH2、及-NH2。