借助活细胞代谢及解毒途径的半导体纳米材料合成及生物应用

来源 :武汉大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pigdun
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,基于纳米材料优异的光学,电学,磁学等性质,纳米材料已经被广泛地用于生物检测,示踪,光电转换及光热治疗等研究领域。通过调节纳米材料的组成、尺寸及形貌等,可以有效地调控纳米材料的各种性能,已发展的化学和物理合成方法有效地实现了对纳米材料的调控,这些合成方法往往涉及强的氧化还原试剂,苛刻的反应条件以及极快的反应速度。随着材料学、化学及生命科学等交叉学科的发展,人们认识到活细胞具有极高的组织化体系和精确的分子调控系统,可以作为无机纳米材料合成的高精度生化反应器,反应温和且高效,能够为纳米材料的合成提供新的路径。这样,利用活细胞内的生化反应实现纳米材料的合成越来越受到科研人员的亲睐。本课题组提出了无机纳米材料合成的“时-空耦合”策略,即:通过精心设计和简单的化学操作使细胞内原本不可能相遇的生化反应(或代谢)途径在适当的时间和空间相遇,在活细胞内实现发光量子点的合成。例如,巧妙耦合酵母细胞的富硒及重金属Cd2+离子的解毒这两条不相关的途径,成功实现了多色荧光CdSe量子点的胞内可控合成。进一步利用分子遗传学方法,研究了胞内发光量子点的合成机理。此外,在细胞可控合成量子点及对胞内生化反应探究的基础上,在胞外构建了可控合成其它纳米材料的“准生物体系”。这样的一个“时-空耦合”新策略解决了目前胞内合成高性能荧光半导体纳米材料的难题,但是如何高效、方便地利用胞内纳米材料的荧光性质,且发展便捷的细胞表面修饰方法又是新的一大挑战。基于此,我们紧紧围绕活细胞的生命活动过程开展了以下工作:(1)构建了基于细胞的全同荧光生物探针用于病原体的高灵敏检测。通过“时-空耦合”策略,我们已经成功地将金黄色葡萄球菌转化为发光细胞信标,所获得的细胞信标亮度高、光稳定性强、荧光转化率高、分散性好且粒径均一。基于细胞表面天然表达的蛋白A能够有效地结合抗体Fc端这一特性,细胞信标能够直接而方便的与抗体结合,从而制备基于细胞的荧光靶向双功能生物探针。结合免疫磁捕获的方法,成功地实现了对禽流感H9N2病毒的检测,可检测的最低浓度为8.94 ng/mL。仅仅通过改变结合于细胞表面的抗体,就能方便地获得各种不同的检测探针,我们已进行了猪伪狂犬病毒、杆状病毒、鼠寒沙门氏菌、乳腺癌细胞等的高灵敏检测。这种简单,灵敏且特异性的方法能够成为一种普适性的检测方法。(2)基于麦胚凝集素标记的细胞信标,发展了一种高效、快速地标记肿瘤细胞的方法。探究了细胞信标随放置时间的光稳定性、荧光转化率、分散性,并且考察了不同批次间细胞信标的荧光光稳定性,进一步证实了细胞信标可以作为一种荧光性质优越的信号报告体。同时利用细胞壁表面的组成成分N-乙酰葡萄糖胺直接与麦胚凝集素(WGA)结合的特点,仅仅将细胞信标与WGA孵育,便能够成功而高效地将WGA修饰于细胞信标表面。利用WGA修饰的细胞信标作为荧光生物探针成功地实现了对肿瘤细胞高效、快速的标记,同时也发展了一种可视化的标记策略。(3)利用金葡菌内生化反应原理实现了胞内纳米材料合成,接着提出了胞内纳米材料合成的生化反应途径,并利用胞内途径指导了胞外纳米材料的可控合成,整个合成条件温和可控。利用胞内合成Te纳米棒的生化反应途径,仅仅通过改变电解质及酶的浓度,即可在胞外可控合成其长径范围为10-200 nm且光学性质可调的Te纳米棒。该方法易被操控,重现性好,可信度高。(4)发展了一种利用活细胞内的生化反应及代谢过程实现了对出芽微粒的荧光自主标记策略。通过对MCF-7细胞内生化反应及代谢途径的探究,通过有效操控细胞,高效耦合活细胞内的代谢及解毒途径,实现了胞内发光CdSe量子点的合成。同时通过细胞对外界环境分泌微粒的机制,实现了微粒在出芽过程中将胞内已合成的量子点进行包裹,从而有效地实现了对微粒的荧光标记,并且能够进一步应用于活体成像研究。
其他文献
在科学研究和工程实践领域存在多种类型的优化问题。多峰优化做为其中的一个分支,长期以来被国内外的学者广泛关注。多峰优化的研究目标不仅要在解空间中搜索全部全局最优解,而且在有些情况下需要搜索局部最优解,这给传统的演化算法带来了挑战。因为传统的演化算法所采用的全局选择模式导致种群个体的选择压力增大,致使种群收敛速度较快,但削弱了种群多样性保持能力。为了解决这一问题,多种与传统演化算法相结合的技术被提出,
随着移动互联网技术的飞速发展,基于用户行为和用户移动性的多源异构数据感知、存储、分析与应用的研究成为大数据时代具有挑战性的课题。一方面,数据量的急剧增加导致了传统数据挖掘算法的性能逐渐下降,数据种类的多种多样使得传统的数据融合和存储的方法无法处理异构型数据;另一方面,数据价值密度低导致了传统数据分析方法优势丧失,数据更新速度加快、时效性高对数据处理与分析的实时性提出了巨大挑战。另外,多源跨域数据的
目的:探究中医湿热病证与脏腑相关的理论。方法:从脏腑功能失调内伤湿热、湿热导致脏腑功能失调两方面来论述,探讨湿热与脏腑的关系。结果与结论:人体脏腑的功能失调,则水谷的运化和气机的运行就会紊乱,导致湿热内生。而湿热亦会导致脏腑的功能失调,内可至五脏六腑,外可合经络、形体官窍,无所不达,故证类繁多。
在过去二十年中,声学人工结构的研究引起了科学界的广泛兴趣。人工结构主要包括声子晶体,超常材料及表面结构三种。一方面,人工结构能展现出许多新奇的物理特性,比如负折射效应;另一方面,利用人工结构能有效调控声波的传播,从而实现诸如成像及隐身等重要功能。目前为止所研究的声学人工结构主要涉及到周期性结构,它们的内在性质可由能带理论进行分析和描述。本文基于周期性人工结构的理论基础,研究了几种新型的扩展型声学人
在动植物的胚胎发育过程中,一个受精卵细胞需要经过多次分裂与分化才能形成具有复杂结构的组织和器官,这种有序结构的形成需要细胞在分裂时必须沿着特定的分裂位点(或平面)进行细胞质分裂,而不能随意选取其它位点,因而,在细胞分裂时能够正确地选择分裂的位点对于胚胎的正常发育是非常重要的。以酿酒酵母为代表的多种芽殖酵母在细胞分裂时其细胞质分裂的位点也不是随机的,而是受到前一个细胞周期留下的空间地标的控制,研究这
茶作为一种集经济、生态和健康等多种功能为一体的产品,其产业的发展直接关乎社会发展的经济效益和社会效益。当前,茶产业在转型发展过程中,面临融资困难,资金流通的难题,直接制约其发展。本文通过对茶产业转型发展现状、存在的问题及成因的分析,探讨了金融支持对茶产业转型的类型,并提出加强金融支持推动对茶产业转型的对策。
天然免疫反应是宿主抵御病毒入侵的第一道防线。而干扰素,包括一型干扰素和三型干扰素就会被激活来抵御病毒的感染,它们通过直接干扰病毒的复制以及激活下游的干扰素刺激基因(ISGs)来消除随后的抗病毒反应,它们是宿主天然免疫反应的重要组成部分。一型干扰素主要包括IFN-α和IFN-β,是天然免疫反应中主要发挥作用的细胞因子;而三型干扰素是最新被发现的一类干扰素主要包括IFN-λ1、IFN-λ2、IFN-λ
迄今为止发现数量尚极其有限的古生菌病毒群体却已展现了极为丰富的多样性,对它们的研究正使人们对病毒的起源、分类和对生命进化的影响形成新的认识。相对于6200多株原核病毒,目前仅有约120株古生菌病毒被报道。由于缺乏稳定、易操作的病毒-宿主间遗传操作系统,仅有少数几株嗜盐古生菌病毒得到深入研究,对于古菌病毒在感染宿主、基因组复制、病毒组装及释放等生命循环过程中调控机制的认识大多还是通过对病毒基因组的生
由于地表变化区域的不确定性和不可预知性,很难定向采集数据。传统的面向全域的数据采集又会导致对非变化区域的重复工作和资源资金等的严重浪费。基于变化区域一般都是极度稀疏的假设,可以采用压缩感知理论研究城市遥感影像的定向变化检测和增量更新问题。前期的实验已经证实,不同时相压缩感知测量数据的差值可用于无损重构变化区域,所需数据量仅为变化区域的数据量的2-3倍。为充分利用变化区域时空连续性和结构等先验信息,
口蹄疫病毒属于小RNA病毒科的成员,其感染存在两种形式,即急性感染和持续性感染。自然条件下,口蹄疫病毒既可以引起偶蹄类动物急性感染,也可以低毒的形式于动物体内产生持续性感染。在离体细胞培养的实验条件下,口蹄疫病毒急性感染导致宿主细胞病变(CPE)死亡。通过改变病毒感染条件和感染后存活细胞的筛选,也可以在实验条件下获得持续性感染口蹄疫病毒的细胞株。病毒持续性感染细胞株的建立有利于深入研究病毒和宿主细