基于网络药理学及实验验证探究草果挥发油改善急性胃炎的作用机制

来源 :西南民族大学学报(自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiexia1987623
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通过气相-质谱联用(GC-MS)、网络药理学、药效学实验、分子生物学实验,对草果挥发油治疗急性胃炎的作用机制进行了探讨.采用GC-MS对草果挥发油成分定性,鉴定出的成分信息导入Swiss Target Prediction平台预测相关靶点,通过GeneCards数据库获取疾病靶点,二者取交集得到草果挥发油改善急性胃炎潜在作用靶点.交集靶点导入String数据库进行蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络构建并筛选出关键靶点.关键靶点导入Metascape网站进行基因本体论(gene ontology, GO)注释与京都基因及基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes KEGG)通路富集.将ICR小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药雷尼替丁组(40 mg/Kg)、草果挥发油低、中、高剂量组(12、24、48 mg/Kg),建立盐酸/乙醇急性胃炎模型.胃组织经苏木精-伊红(HE)染色法染色于显微镜下观察,酶联免疫吸附剂测定(ELISA)血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.根据网络药理学结果筛选排名靠前两位的TNF-α、表皮生长因子受体(EGFR)进行免疫印迹(Western blot, WB)实验验证.GC-MS鉴定出挥发油成分38个,包含烯烃类、醇类、醛类、酯类、苯及其衍生物等;通过预测,获得成分靶点756个,疾病靶点1 202个,交集靶点84个;通过PPI结果筛选得出38个关键靶点,其中TNF-α、EGFR度值排名最高;GO富集分析共涉及生物过程(biological process, BP)、细胞组分(cell components, CC)、分子功能(molecular function, MF) 3个方面;KEGG富集分析主要涉及癌症通路、TNF信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinosital 3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路等;HE染色观察到给药后小鼠胃黏膜损坏、充血、水肿、炎症细胞浸润等现象有所改善;ELISA检测结果显示随着剂量增大,TNF-α含量呈现下降趋势;WB结果显示,与正常组比较,模型组TNF-α表达量上升,EGFR表达量下降.与模型组比较,给药组TNF-α表达量下降,EGFR表达量上升.表明草果挥发油可能通过调控TNF-α、EGFR蛋白表达量,从而发挥对抗急性胃炎、保护胃黏膜的作用.
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