【摘 要】
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利用GenBank和UniProt数据库比对Morganella morganii J-8羰基还原酶基因和氨基酸序列,以同源性为依据,结合高效液相色谱(HPLC)检测验证,筛选出5株同样具有转化1-苯基-2-甲氨
【机 构】
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江南大学工业生物技术教育部重点实验室粮食发酵工艺与技术国家工程实验室
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)(2011AA100905);2008年度江苏省高校“青蓝工程”科技创新团队项目;江苏高校优势学科建设工程项目
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利用GenBank和UniProt数据库比对Morganella morganii J-8羰基还原酶基因和氨基酸序列,以同源性为依据,结合高效液相色谱(HPLC)检测验证,筛选出5株同样具有转化1-苯基-2-甲氨基丙酮(MAK)产d-伪麻黄碱功能的菌株。选取其中1株Bacillus clausii B0658,对其d-伪麻黄碱的生物转化过程进行考察,发现在最优条件下d-伪麻黄碱产量达到128.3 mg/L。进一步对B.clausii B0658的亮氨酸脱氢酶基因bcdh进行扩增,以pET28a(+)为载体构建重组质粒并在Escherichia coli BL21(DE3)中实现表达,通过重组菌的生物转化实验验证该酶的催化功能。
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