【摘 要】
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以人型结核分枝杆菌H37RV株基因组DNA为模板,应用PCR法对ESAT-6和CFP10基因进行扩增,产物经纯化后与载体PMD18-T连接、转化及酶切鉴定,亚克隆到原核表达载体PGEX-6P-1,构建原
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以人型结核分枝杆菌H37RV株基因组DNA为模板,应用PCR法对ESAT-6和CFP10基因进行扩增,产物经纯化后与载体PMD18-T连接、转化及酶切鉴定,亚克隆到原核表达载体PGEX-6P-1,构建原核重组表达质粒,转化入大肠杆菌BL21中,以1 mmol/L IPTG诱导,进行SDS-PAGE电泳.结果表明,ESAT-6和CFP10基因表达的融合蛋白相对分子质量分别为32 000和36 000,与实测相符.重组结核杆菌分泌蛋白ESAT-6和CFP10的成功表达为结核病诊断及重组疫苗的构建打下了基础.
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