梭梭bZIP基因HabZIP60克隆及非生物胁迫下的表达分析

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碱性亮氨酸拉链(basic region/leucine zipper motif, bZIP) 转录因子是真核生物中广泛分布且保守的一类蛋白,在植物生长发育及非生物胁迫响应过程中起重要作用。为研究梭梭(Haloxylon ammodendron)bZIP转录因子基因HabZIP60的表达及其mRNA的剪切在非生物胁迫响应中的功能,本研究利用反转录PCR从梭梭中克隆HabZIP60,对其基因序列进行生物信息学分析并构建进化树,利用烟草(Nicotiana tabacum)表皮瞬时表达技术分析其蛋白亚细胞定位,利用半定量PCR检测HabZIP60 mRNA在二硫苏糖醇(DTT)诱导下的剪切,利用实时荧光定量PCR检测HabZIP60在高温、脱水、ABA、盐处理下的表达情况。结果显示:HabZIP60 mRNA存在未剪切(U)和剪切(S)两种形式,HabZIP60 U蛋白主要定位于内质网,与甜菜(Beta vulgaris)等藜科植物bZIP60 U蛋白亲缘关系较近,HabZIP60 S蛋白主要定位于细胞核;二次高温胁迫促进了HabZIP60的表达及其mRNA的剪切,表明HabZIP60的表达及其mRNA的剪切有高温胁迫记忆特征;此外,HabZIP60的表达及其mRNA的剪切受ABA、脱水胁迫及NaCl胁迫诱导。研究结果表明HabZIP60在非生物胁迫引起的内质网应激响应中可能具有重要调控作用。本研究加深了对HabZIP60在非生物胁迫适应性中的作用的理解,对荒漠植物耐逆机制研究具有推动作用。
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