【摘 要】
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目的 通过外周血非动员干细胞液培养获得红系有核细胞,以分析红系特异性表达的血型基因.方法 外周血经离心分离和免疫磁珠分选获得CD34+造血干细胞,体外液体定向培养生成红系有核细胞.分别取不同培养期的细胞进行免疫荧光和染色分析,并取培养+12 d的细胞进行Rh和ABO血型基因RNA转录分析.结果 从约50 mL外周血中分离到CD34+细胞(3.19±0.13)×104个(总回收率为67.3％±2.7
【机 构】
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310006杭州,浙江省血液中心、卫生部血液安全研究重点实验室,310006杭州,浙江省血液中心、卫生部血液安全研究重点实验室,310006杭州,浙江省血液中心、卫生部血液安全研究重点实验室,3100
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目的 通过外周血非动员干细胞液培养获得红系有核细胞,以分析红系特异性表达的血型基因.方法 外周血经离心分离和免疫磁珠分选获得CD34+造血干细胞,体外液体定向培养生成红系有核细胞.分别取不同培养期的细胞进行免疫荧光和染色分析,并取培养+12 d的细胞进行Rh和ABO血型基因RNA转录分析.结果 从约50 mL外周血中分离到CD34+细胞(3.19±0.13)×104个(总回收率为67.3％±2.7％).经红系定向培养,大约+9d时细胞数爆增至平台期(7.57±0.78)×106个,扩增约237.1±15.5倍.在培养过程中,标志细胞干性的CD34抗原逐渐下降,红系特异性标志CD235a和CD240D逐渐上升.培养+12 d细胞提取的RNA,均能扩增出RHD/CE和ABO基因,DNA序列分析表明其基因型符合血清学表型.结论 建立了一种源于外周血非动员干细胞体外培养分析红系血型基因表达情况的方法,该技术可用于各种红系特异性表达基因的研究。
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家系1 先证者,男,29岁,结婚6年,妻3次妊娠均于80天左右自然流产.先证者表型、外生殖器发育无异常,精液常规检查正常.夫妻非近亲结婚,无遗传病家族史.妻子月经规律,孕期无患病及服药史,无有毒有害物质及放射线接触史;妻子妇科检查、优生四项检查未见异常.细胞遗传学检查:常规外周血淋巴细胞培养、染色体制备、G显带分析,计数30个分裂相,镜下分析5个,先证者核型为46,XY,t(12;20)(12pt
目的 调查中国拉萨藏族无关个体D6S1043、D7S3048、D9s925、D10S2325、D11S2368、D14S608、D15S659、D17S1290、D20S470和GATA198805等10个短串联重复（shorttandemrepeat,STR）基因座的遗传多态性。方法用自行构建的10个常染色体STR基因座荧光复合扩增体系对拉萨藏族208名无关个体的上述10个STR基因座进行遗传多
患者 女，33岁，已婚5年，因原发闭经就诊。患者系第1胎，足月顺产，表型及智力正常，父母属非近亲婚配，母孕期无有害物质接触史。体检：身高172cm，体重55．5kg，营养中等。患者为原发性闭经，17岁时曾就医，因家境贫穷未进一步诊疗。患者第二性征发育差，乳房未发育，无腋毛、阴毛，外阴呈幼女型。无蹼颈及肘外翻，躯干及四肢无畸形。超声检查：子宫大小28mm×10mm×6mm，宫壁回声均匀，子宫内膜显示
先证者女，39岁。月经规律，结婚15年，第1胎足月顺产1名女孩，现年13岁，表型、智力正常；第2～7次妊娠均于2个月左右自然流产；第8次妊娠至7个月时，经B超检出胎儿患单脐动脉、心脏畸形而引产；第9次妊娠于2个月胚胎停止发育；第10次为生化妊娠。体检：女1科检查正常，优生四项检查及内分泌检企无异常。夫妻非近亲结婚，孕期无患病及服药史，无有毒有害物质及放射线接触史。
目的 对1个四川籍家族性噬血细胞综合征（familial hemophagocytic lymphohistiocytosis，FHLH）家系进行基因突变分析，为其家系成员提供准确的病因诊断和遗传咨询。方法分析1例FHLH先证者的临床病例资料，应用聚合酶链反应对先证者及父母与原发性噬血细胞综合征（primary hemophagocytic lymphohistiocytosis，pHLH）发病相
目的 分析8个遗传性异常纤维蛋白原血症家系的临床及基因突变特征。方法用全自动血液凝固分析仪检测先证者及部分家系成员的凝血酶原时间（prothrombin time，PT），活化部分凝血活酶时间（activatedpartialthromboplastin time，APTT），凝血酶时间（thrombin time，TT），纤维蛋白原（fibrinogen，Fg）活性，硫酸鱼精蛋白对TT的校正试验
目的 对1例临床怀疑且经尿筛查诊断为琥珀酸半醛脱氢酶缺陷病的患儿及家系进行ALDH5A1基因突变分析,以进一步明确诊断和辅助遗传咨询.方法 应用聚合酶链反应及DNA直接测序技术对1例琥珀酸半醛脱氢酶缺陷病患儿及其父母的ALDH5A1基因进行突变位点检测,同时检测100名健康对照者的ALDH5A1基因以排除多态性变异.结果 患儿携带有ALDH5A1基因编码区序列第3外显子c.527G＞A(p.Gly
患儿 女,68天,因生长发育迟缓就诊.患儿出生时父29岁、母29岁,系第3胎第2产,母孕39+2周选择剖宫产娩出,出生体重2.1 kg.患儿母亲曾于6年前剖宫分娩一男婴,系脑积水及脊柱裂患儿,生后3h死亡.之后自然流产1次,此后一直不孕,患儿系服用促排卵药后怀孕,于孕7个月时发现胎儿脑积水.查体:体重2.4 kg,身长47 cm,均小于同胎龄儿第3百分位.一般状态及反应差,哭声弱,易激惹,身体呈左
目的 探讨超声引导下羊膜腔穿刺术用于双胎妊娠的产前诊断的临床意义.方法 超声引导下对23名妊娠双胎孕妇行羊膜腔穿刺术进行胎儿染色体异常的产前诊断,并于术后3周及分娩后分别进行随访.结果 23名孕妇共妊娠46名胎儿,其中45份羊水细胞培养成功,成功率为97.83％(45/46).发现3例染色体异常核型,染色体异常率为6.67％(3/45).46名胎儿未发生流产,羊膜腔穿刺术后随访未发现异常.结论 孕