探讨二十二碳六烯酸(DHA)激活正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(BK通道)的机制。
方法采用酶消化法急性分离正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞；全细胞膜片钳实验技术记录正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流；膜内向外型单通道膜片钳实验技术记录不同钙离子浓度条件下BK通道电流，并计算开放概率(NP0)；钙离子成像技术测定不同浓度DHA作用后及分别采用磷脂酶(CPLC)受体抑制剂和三磷酸肌醇(IP3)受体抑制剂预孵育冠状动脉平滑肌细胞后细胞内钙离子浓度变化。
结果1 μmol/L DHA可激活BK通道；在刺激电位60 mV，电极外液钙离子浓度为0、0.01、0.1、1、3、10、50和100 μmol/L条件下，BK通道NP0分别为0.002 7±0.000 4、0.006 0±0.001 4、0.097 2±0.010 6、0.137 9±0.032 9、0.468 7±0.163 7、2.097 1±0.310 4和3.120 4±0.242 7(P<0.05，n＝4)。未加DHA时，细胞内钙离子浓度荧光信号比值(R值)为0.51±0.01；加入0.001和0.01 μmol/L DHA后，R值分别为0.53±0.02和0.55±0.01，与未加DHA相比差异无统计学意义(P>0.05, n≥5)；当加入的DHA浓度为0.1、0.3、1、3、5和10 μmol/L时，其R值分别为0.64±0.01、0.65±0.01、0.70±0.01、0.69±0.01、0.68±0.01和0.67±0.02，EC50为(0.04±0.02)μmol/L，与未加DHA比较，差异有统计学意义(P<0.05，n≥4)。分别采用PLC受体抑制剂U73122和IP3受体抑制剂2-APB预孵育冠状动脉平滑肌细胞，测定加入0.1 μmol/L DHA后R值分别为0.52±0.01和0.49±0.02，低于未加抑制剂的R值(0.64±0.01，P<0.05，n≥4)。
结论DHA可通过PLC-IP3-Ca2＋途径增加正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞内钙离子浓度激活BK通道，从而扩张血管，对心血管系统有一定的保护作用。